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-80℃
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90天
- 英文名:
pGWB12
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pGWB12
货号:KM102050
图谱:微客服
宿主:植物
用途:蛋白表达
片段类型:ORF,GateWay
片段物种:空载体
原核抗性:Kan
真核抗性:Hyg,Neo/G418
荧光标记:
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文献和实验良好的的基因治疗效果,在美国已经开展了临床研究,效果非常理想,因此具有广阔的应用前景。 慢病毒转染优点:1.外源基因表达水平较高、表达稳定;2.转染效率高,可感染分裂和不分裂的细胞,几乎可以感染所有类型的细胞,特别适合质粒载体转染效率低的细胞;3.慢病毒基因容易操作,易于制备大量病毒且滴度高;4.病毒基因组可整合到细胞基因组,易于构建稳定细胞株。 慢病毒包装技术:慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。将外源基因克隆进入表达载体,同时与包装质粒(表达病毒包装所需辅助蛋白)一起转染
的粘端解链, 迅速将混合物转入冰浴。3) 加入含ATP的10×Buffer 1μl,T4 DNA连接酶合适单位, 用ddH2O 补至10μl。2、盖上管盖,充分混匀,台式离心扣上离心5秒。3、12℃下过夜连接反应。4、反应结束后于-20℃保存。5、再设立两个对照反应,其中含有(1)只有质粒载体;(2)只有外源DNA片段。如果外源DNA量不足,每个连接反应可用50-100ng质粒DNA,并尽可能多加外源DNA,同时保持连接反应体积不超过10μl。可用至少3种不同方法来测定T4噬菌体DNA连接
相关专题 【基本原理】 利用DNA连接酶把目的DNA片段和载体DNA连接在一起,成为一个新的重组 分子。目的DNA片段被限制酶消化后其末端只可能有3种形式: (1)带有相同的粘性末端:用同一种酶或同尾酶处理可得这样的末端。由于质粒载体 也必须用同样的酶消化,亦得两个相同的粘性末端,因此在连接反应中,外源目的基因片段和质粒载体DNA均可能发生自身环化,而且正反两种连接方向都有。为防止载体DNA自身环化,在连接前需除去载体分子
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