- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM102986
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃
- 保质期：
90天
- 英文名：
pTEF:ATP
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：pTEF:ATP
货号：KM102986
图谱：微客服
宿主：酵母菌
用途：蛋白表达
片段类型：ORF
片段物种：
原核抗性：Amp
真核抗性：Neo/G418
荧光标记：
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文献和实验的粘端解链， 迅速将混合物转入冰浴。3) 加入含ATP的10×Buffer 1μl，T4 DNA连接酶合适单位， 用ddH2O 补至10μl。2、盖上管盖，充分混匀，台式离心扣上离心５秒。3、１２℃下过夜连接反应。4、反应结束后于－２０℃保存。5、再设立两个对照反应，其中含有（１）只有质粒载体；（２）只有外源DNA片段。如果外源DNA量不足，每个连接反应可用50-100ng质粒DNA，并尽可能多加外源DNA，同时保持连接反应体积不超过10μl。可用至少３种不同方法来测定Ｔ４噬菌体DNA连接
相关专题 4.1 实验原理 4.1.1 DNA的连接策略 质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段(＜10kb)且结构简单，质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆，从原理上说是很简单的，先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段，然后体外使两者相连接，再用所得到重组 质粒转化细菌，即可完成。 外源DNA片段和质粒载体 的连接反应策略有以下几种： （1）互补性粘性末端的连接 单一限制
1、连接缓冲液的影响：大体上缓冲液含有以下组分：20-100mmol/L的Tris-HCl，较多用50mmol/L，pH的范围在7.4-7.8，较多用7.8，目的是提供合适酸碱度的连接体系；10mmol/L的MgCl2，作用是激活酶反应；1-20mmol/L的DTT，较多用10mmol/L，作用是维持还原性环境，稳定酶活性，25-50ug/ml的BSA，作用是增加蛋白质的浓度，防止因蛋白浓度过稀而造成酶的失活。与限制酶缓冲液不同的是连接酶缓冲液还含有0.5-4mmol/L的ATP，现多用
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