- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM102926
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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-80℃
- 保质期：
90天
- 英文名：
ph7SK-gRNA
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：ph7SK-gRNA
货号：KM102926
图谱：微客服
宿主：哺乳细胞
用途：基因敲除
片段类型：
片段物种：
原核抗性：Kan
真核抗性：Neo/G418
荧光标记：
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文献和实验μM）5μlNaCl 100 mM（终浓度）Tris‐Cl pH7.4 50 mM（终浓度）加水补足 50 μl将配制好的退火反应缓冲液重复混合，短暂离心后放置 PCR 仪上，运行以下程序： 90℃ 4 min， 70℃ 10 min， 55℃ 10 min， 40℃ 10 min， 25℃ 10 min。退火后的寡核苷酸可以立刻使用或者在 ‐20℃ 长期保存。三、 pCas9/gRNA 基因敲除载体的构建用 EcoRV 酶切 2 μg pCas9/gRNA 载体（inovogen）。通常
研究领域中，CRISPR 技术日渐成熟，当然每家公司所使用的具体 protocol 跟质粒载体不尽相同，做出来的稳定细胞株还是有点差异的，编者就不多赘述。还有少数公司比如汉尹公司，也可以利用 CRISPR/Cas9 技术去提高细胞内源基因的表达，效果可以与转染过表达质粒相媲美，避免了外源基因对细胞的影响，优势显而易见。作为一家成熟的抗体公司，我们也会利用 CRISPR/Cas9 去 knockout 做敲除验证，这对于抗体特异性的判断是用 siRNA 所不能比的。如果研究人员经常利用 CRISPR
DNA分子的体外连接就是在一定条件下， 由DNA连接酶催化两个双链DNA片段组邻的５’端磷酸与３’端羟基之间形成磷酸酸脂键的生物化学过程， DNA分子的连接是在酶切反应获得同种酶互补序列基础上进行的。带有相同末端(平端或粘端)的外源DNA必须克隆到具有匹配末端的线性质粒载体中，但是在连接反应时，外源DNA和质粒都可能发生环化，也有可能形成串联寡聚物。因此，必须仔细调整连接反应中两个DNA 的浓度，以便使“正确”连接产物的数量达到最佳水平，此外还常常使用碱性磷酸酶去除5’磷酸基团以抑制载体DNA
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