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-80℃
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90天
- 英文名:
pLTR-G
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pLTR-G
货号:KM102869
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞,慢病毒
用途:包装辅助
片段类型:ORF
片段物种:病毒
原核抗性:Kan
真核抗性:Neo/G418
荧光标记:
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文献和实验1 、将转染后的细胞按照一定的比例接种到 6 孔板中(一般选用 1 : 10 和 1 : 100 两个梯度),分别采用 1200 m g/ml , 1000 m g/ml 和 800 m g/ml 的 G418 进行筛选; 以转染携带 EGFP 质粒载体的细胞作为阳性对照,以未转染质粒载体的细胞作为阴性对照; 2 、每 3 ~ 4 天换液一次; 3 、筛选 20 ~ 30 天,即可得到稳定表达细胞株; 4 、传代后,以一定的 G418 浓度
非病毒载体介导的基因治疗有许多优点,但就目前大多数表达体系而言普遍存在外源基因表达水平低而短暂等问题为了使外源基因稳定持续表达,必须对质粒DNA 进行改造。附着体质粒载体(episomal vector)可以使外源基因以附着体形式复制,分离到子代细胞,从而使基因高效持续表达,是种新型的非病毒表达载体 。 我们构建了以EB病毒(Epstein Barr virus,EBV)复制子(EBV replicon,EBVR)为基础的附着体质粒载体,并将报告基因增强型绿色
可以用于任何DNA导入哺乳类动物进行暂时性表达或长期转化的研究。该方法往往被用于贴壁细胞的转染,也是最好的方法。 1. 试剂的配制 (1)2×HBS 1.63 g NaCl ;1.19g Hepes;0.023 g Na2 PO4 ·2H2 O;加水至100 ml pH 7.1 过滤,4℃保存 (2)2mmol/L CaCl2 过滤除菌 (3)TE:0.1mmol/L EDTA,1mmol/L Tris-HCL PH 8.0 (4)G418(新霉素G418)液:1g G418溶于
技术资料








