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90天
- 英文名:
pCDNA3.1-HA-Ub-K27R
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100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pCDNA3.1-HA-Ub-K27R
货号:KM102272
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:人
原核抗性:Amp
真核抗性:Neo/G418
荧光标记:
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文献和实验,表达载体pCDNA3,pCDNA3.1(+),pCDNA3.1(-),表达载体pcmv-ha以及表达载体 pCMV-Myc的图谱 http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2019694_0.html pMD18-载体图谱:http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/2993026_0.html pGEX-KG载体图谱序列:http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post
通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增,得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小,然后通过胶回收,获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基,回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒:将原始的质粒载体,比如 pcDNA3.1 质粒,选择合适的酶切位点,比如 NheI/KpnI 进行酶切,获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul,试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时,或适当延长时间,保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
通过加入基因组 DNA 模板以及设计好的引物进行目的基因的扩增,得到 PCR 产物后进行琼脂糖凝胶电泳验证条带大小,然后通过胶回收,获得纯化目的片段产物。由于加入保护碱基,回收产物需要进行限制性内切酶切从而暴露黏性末端。2. 线性化质粒:将原始的质粒载体,比如 pcDNA3.1 质粒,选择合适的酶切位点,比如 NheI/KpnI 进行酶切,获得线性化的质粒。酶切体系一般选择 50ul,试剂加好之后 37°C 孵育 6~8 小时,或适当延长时间,保证质粒酶切完全。每隔一段时间振荡一下并离心以防液滴蒸发
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