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90天
- 英文名:
pET-32c(低拷贝)
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100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pET-32c(低拷贝)
货号:KM101538
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:空载体
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验DNA并用指示限制酶消化。通过限制酶消化鉴定插入物的存在。M:DNA标记,1:用BamHI / SalI消化后的重组pET-32α(+)载体经验有时通过PCR仍然难以获得DNA产物,因为引物被定义为具有起始密码子和终止密码子的有限区域,因此人工合成所需的基因是获得DNA片段的替代选择。根据我们的经验,表达载体很大或具有低拷贝数,因此更有效的方法是首先将DNA片段克隆到非表达载体中,然后将其亚克隆到表达载体中。确保在感受态细胞中设置没有载体的阴性对照和在转化期间在大肠杆菌细胞中单独使用空载体的阳性
-GFP 等)以及其他应用的质粒。根据质粒的拷贝数不同,又可以分为高拷贝质粒(质粒可以在细胞内复制成几百个拷贝)和低拷贝质粒(质粒在细胞内只有<20 个拷贝)。质粒的拷贝数通常受到复制子的调控。 质粒上通常会带有多种元件,例如,复制起始位点(ORI),抗性基因,多克隆位点,启动子,终止子,标签序列等等。质粒上至少要带有复制位点(ORI),否则无法进行复制;除了一些特殊质粒(如 minicircle plasmid)之外,绝大多数质粒都带有抗性基因,用于抗生素筛选。多克隆位点可以通过酶切,酶连或者同源
条件:①容易进入寄主细胞;②进入寄主细胞后能够独立进行自主的复制和表达;③容易从宿主细胞中分离纯化。 在基因工程中常用的载体有: 1.质粒——环状双链小型 DNA 分子,种类丰富,常见的有pUC系列、pET系列等。 2.噬菌体——如λ噬菌体,用于细菌细胞。 3.病毒——如猿猴空泡病毒SV40,常用作动物细胞基因工程的载体。 含有目的基因的DNA片段和载体DNA连接技术即DNA重组技术,其核心步骤是DNA片段之间的体外连接,涉及限制酶、连接酶等的酶促反应。把目的
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