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90天
- 英文名:
pJQ200SK
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pJQ200SK
货号:KM101314
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因敲除
片段类型:ORF
片段物种:空载体
原核抗性:Gen
真核抗性:SacB
荧光标记:
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文献和实验,可以通过合适的方法转染宿主细胞以回收具有感染性的病毒粒子,大体上有两种途径可达此目的。 3. 1 将全长cDNA 克隆到含有强启动子的质粒载体上,在体外用RNA 聚合酶转录系统进行体外转录得到感染性转录本(RNA) ,再用转录产物感染宿主 细胞,回收感染性病毒粒子。这种方法中启动子的选择是很重要的,因为它将影响到体外转录本的产量和完整性。人们经常使用的启动子有: T7 , T3 ,Sp6 等强的启动子。在使用启动子的策略上,既可以把全长cDNA 序列克隆到含有这些启动子的载体中,又可以在合成
,与构建文库用的同一批cDNA加上EcoRI人工接头后,与经内切酶EcoRI酶切并去磷酸化的质粒载体Bluescript SK相连,并转化感受态细菌TG1,同样铺平板加入IPTG和X-Gal,37℃培养过夜,次日挑出9个白色细菌斑,分别接种入5 mL液体LB培养基中培养,小量提取质粒,并用内切酶EcoRI酶切后,进行琼脂糖凝胶电泳以鉴定切出片段的大小。(9)对上述构建的的cDNA库进行扩增,取105个噬菌体转染宿主菌E.coli Y 1090,铺板,保温后,加15MLSM,室温振荡2小时,回收SM
作物。在燕麦中,至今尚无 RNA 沉默的研究报道。RNAi 作为一种研究植物功能基因组的工具,确切地说,第一次大规模地使用是在拟南芥和玉米研究中,超过 100 个目的基因被沉默[41]。研究的关键一直集中在设计和构建可用的质粒载体,以便引发 RNAi 的外源基因能稳定地整合到染色体组中。本章将介绍目前在大麦和小麦中,下调基因表达所使用的 RNAi 和 VIGS 等多种方法。相对而言,虽然 RNA 基因沉默已是一项广泛应用的技术,但是,在植物研究中对其进行优化的报道相对较少。一段给定的序列能否产生 RNA
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