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-80℃
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90天
- 英文名:
pET-42b(低拷贝)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pET-42b(低拷贝)
货号:KM101252
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:空载体
原核抗性:Kan
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验-GFP 等)以及其他应用的质粒。根据质粒的拷贝数不同,又可以分为高拷贝质粒(质粒可以在细胞内复制成几百个拷贝)和低拷贝质粒(质粒在细胞内只有<20 个拷贝)。质粒的拷贝数通常受到复制子的调控。 质粒上通常会带有多种元件,例如,复制起始位点(ORI),抗性基因,多克隆位点,启动子,终止子,标签序列等等。质粒上至少要带有复制位点(ORI),否则无法进行复制;除了一些特殊质粒(如 minicircle plasmid)之外,绝大多数质粒都带有抗性基因,用于抗生素筛选。多克隆位点可以通过酶切,酶连或者同源
加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α(+)载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α(+)载体骨架连接基因片段1小时,载体末端和插入末端的比例为1:3(fmol)。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21(DE3)在冰上混合10分钟,并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
√ √ √ N端特性 信号肽序列 √ √ Strep•Tag II√ √ √ √ √ √ √ √ Ek/LIC位点√ √ √ √ √ 3C/LIC位点√ √ √ C端特性 Thrombin位点√ √ √ His•Tag√ √ √ √ √ √ √ √ 复制子 低拷贝ColE1(pBR)√ √ 高拷贝ColE1(pUC)√ √ √ √ √ √ 抗性 √ √ √ √ √ √ √ √ Introductory Strep•Tag® II Kit, pET-51b货号:71615
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