Polyplus蛋白质、抗体&多肽转染试剂PULSin®

Polyplus蛋白质、抗体&多肽转染试剂PULSin®(101000010)

产品简介：

使用PULSin®递送蛋白质和抗体是功能研究的一种强大方法。例如，PULSin®能够通过控制蛋白质输送到细胞中的水平和时间过程来研究致命蛋白质。类似地，阻断抗体的递送可以为传统的RNA干扰实验提供额外的信息。使用PULSin®，您可以在活细胞中用抗体靶向细胞内蛋白质，而无需固定步骤。

一、将蛋白质/抗体和肽有效递送至细胞质——蛋白质

PULSin®能够将R-藻红蛋白（一种荧光蛋白（240 kD））输送到高达98%的细胞的细胞质中。如图1所示，蛋白质均匀分布在细胞质中，由于其体积大而被排除在细胞核之外。

图1:PULSin®介导的R-藻红蛋白向NIH-3T3细胞的细胞内递送。将R-藻红蛋白（1µg）与4µl PULSin®复合15分钟，并在24孔板中添加到NIH-3T3细胞中。16小时后通过荧光显微镜观察活细胞。

二、将蛋白质/抗体和肽有效递送至细胞质——抗体

抗体也被成功地输送到HeLa细胞，并能够识别细胞质内的靶蛋白。

例如，PULSin®允许将FITC标记的抗α-微管蛋白递送到85%的HeLa细胞的细胞质中（图2）。类似地，将抗giantin Alexa Fluor®488递送到98%的活HeLa细胞细胞质中，标记高尔基体（图3）。

图2：用PULSin®向HeLa细胞递送荧光素偶联的抗α-微管蛋白抗体。

图3：使用PULSin®递送1µg Alexa Fluor®488抗Giantin后24小时HeLa细胞的高尔基标记（绿色）.

 

质膜用ConA罗丹明染色。通过共聚焦显微镜观察细胞。

三、将蛋白质/抗体和肽有效递送至细胞质——肽

肽是在低浓度下具有高特异性的生物分子。将底物、抑制剂、调节剂或阻断肽递送到细胞中可以进行蛋白质功能研究以及治疗方法的开发。PULSin®能够成功地将链球菌TPE B表位递送到HeLa细胞中（图4）。

图4：将Pep-A（链球菌TPE B表位，16aa）递送到HeLa细胞中。配合物由Pep-A（1µg，赖氨-罗丹明衍生物，Sigma）和PULSin®（4µl）形成。分娩后16小时进行观察。

其他蛋白质、抗体和肽也可以使用PULSin®输送到细胞中（表1）。

表1：使用PULSin®递送至细胞的蛋白质、抗体和肽的实例

产品优势一：PULSin® 易于使用且速度快

与使用病毒转导或化学结合的其他技术相比，PULSin®将为您节省时间和精力。PULSin®试剂可随时使用，并配有稀释缓冲液和荧光控制蛋白（R-藻红蛋白）。该方案很快：只需将试剂添加到蛋白质中，孵育并添加到细胞中。可以在递送后4小时开始分析细胞。

图 5: PULSin^® – Protocol

产品优势二：输送到多种细胞

PULSin®能够向多种细胞系和原代细胞输送蛋白质和抗体（表2，图1-3）。

表2：使用PULSin®在选定细胞中递送R-藻红蛋白的效率。

产品优势三：高效传输

PULSin®与另外两种蛋白质递送试剂的比较显示蛋白质递送效率更高（图5）。此外，根据R-藻红蛋白和FITCα-微管蛋白抗体的测量，PULSin®每细胞递送的蛋白质量更高（图6）。

图6：PULSin®与其他两种蛋白质递送试剂的效率比较。根据制造商的方案，将R-藻红蛋白（1µg）与每种试剂络合。将配合物加入到HeLa细胞中，并通过荧光显微镜观察24小时。

图7：用PULSin®或竞争试剂B和C递送R-藻红蛋白（上图）或FITC抗α-微管蛋白抗体（下图）后的HeLa细胞的FACS分析。数据以每个细胞群的平均荧光强度的直方图表示。

产品优势四：递送机制

PULSin®含有一种专有的阳离子两亲分子，可与蛋白质和抗体形成非共价复合物。复合物通过阴离子细胞粘附受体内化，并释放到细胞质中进行分解。该过程无毒，可提供功能蛋白。

产品应用一：蛋白质递送

 

在其他方法（DNA转染、RNAi转染）失败的情况下，蛋白质向活细胞的细胞内递送作为一种科学研究工具提供了一种强大的替代方案。

产品应用二：抗体递送

将抗体引入活细胞的能力为广泛的应用开辟了新的见解，如蛋白质细胞内运输研究、阻断抗体的蛋白质干扰研究、活免疫标记或蛋白质磷酸化状态研究。

产品信息：

货号	产品名称	阳性对照（R-藻红蛋白）	Hepes稀释缓冲液
101000010	PULSin® 0.4 mL	20 µg	20 ml