睿科蛋白组学样本前处理试剂盒

蛋白质组学本质上指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征，包括蛋白质的表达水平、亚细胞定位、翻译后的修饰、蛋白与蛋白相互作用等，由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生、细胞代谢、生长发育以及各种胁迫反应等过程的整体而全面的知识。

 

随着生物质谱技术迅速发展，质谱技术已经逐渐成为了蛋白质组学分析的主流技术。质谱仪器具有高灵敏度、高分辨率等特点，样本前处理的质量和可重复性显著影响质谱仪的分离和鉴定能力。

 

蛋白质组学样本前处理流程复杂、处理时间长（传统蛋白质组前处理需过夜），造成了样品前处理不稳定、样品质量参差不齐，重现性差等问题，急需一种高效、高回收率、抗干扰能力强的蛋白质组学分析的前处理方法。

 

蛋白质组学分析流程

 

 

睿科集团推出的蛋白组学样本前处理试剂盒，其中的关键组分是一种新型固相烷基化试剂，与传统的烷基化试剂相比，采用新型固相烷基化试剂，蛋白质可与其它小分子（如糖、盐、表面活性剂、脂类等）实现快速分离，提高蛋白质的纯度，显著降低样本复杂程度。同时，试剂表面亲水性较好，可显著提高蛋白质或酶解产物的回收率。产品适用于处理各种来源的蛋白质组样品，如细胞、血浆、细菌、肿瘤组织等

 

睿科蛋白组学样本前处理试剂盒

（新型固相烷基化试剂）

 

 

产品特点

一、高效

操作简便、高效，一站式覆盖蛋白质组提取到消化的所有步骤

二、高回收率

蛋白质组处理回收率高，可满足纳克至微克级别蛋白质组样品的处理需求

三、抗干扰

抗干扰能力强，对样品中表面活性剂、有机试剂、各种酸碱缓冲溶液等均可耐受

四、适配自动化

除手动操作外，可适配睿科自动化前处理设备

 

 

产品测试数据

使用试剂盒对293T细胞处理后进行重复性验证

材料：用 6M 盐酸胍超声裂解 293T 细胞离心获得

实验方法：随机选取2批次试剂，将同一样品分为6份，每批次试剂各做3个平行样品，使用蛋白组学样本前处理试剂盒流程处理后，将样品进行Q Exactive质谱检测。

 

Q Exactive质谱检测结果如下：

表1：不同批次前处理试剂处理293T蛋白样品QE质谱检测蛋白数及零漏切率

图1：不同批次试剂处理293T蛋白样品质谱检测重复性Pearson Correlation Coefficient均＞0.99

 

使用试剂盒对E. coli 样本处理后进行重复性验证

 

材料：用 6M 盐酸胍超声解 E. coli 离心获得

实验方法：随机选取2批次试剂，将同一样品分为6份，每批次试剂各做3个平行样品，使用蛋白组学样本前处理试剂盒流程处理后，将样品进行Q Exactive质谱检测。

 

Q Exactive质谱检测结果如下：

表2：不同批次前处理试剂处理E.coli蛋白样品QE质谱检测蛋白数及零漏切率

图2：不同批次试剂处理E.coli 蛋白样品质谱检测重复性Pearson Correlation Coefficient均＞0.99

 

■ 实验总结

对293T 细胞和E. coli 样本分别用两批次试剂进行前处理，批间的重复性测试表明可检测到的蛋白数及零漏切率基本一致，达到预期要求；检测结果皮尔斯相关系数介于0.991-0.996之间。说明不同批次试剂实验结果重复性好。