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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
瓶身或者咨询
- 保质期:
COA
- 英文名:
MAIGE
- 库存:
999
- 供应商:
麦格生物
- CAS号:
无
- 规格:
10mL
产品简介:
HT培养基补充物是次黄嘌呤(Hypoxanthine, 5mM)、和胸苷(Thymidine, 0.8 mM)的混合物,主要用于杂交瘤细胞和细胞培养应用。培养基中所有自融合的突变骨髓瘤细胞或未融合的骨髓瘤细胞被除后,就不再需要氨基蝶呤了,细胞可以用HT培养基进行培养。-瓶本试剂加入10ml培养基即为50X储备液,稀释1X最终工作浓度为100μM次黄嘌呤、16μM胸腺嘧啶核苷。
保有条件: 2rC存有效期两年,

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文献和实验一、有限稀释法材料:a、96孔细胞培养板等;b、HT培养基;c、活力强的杂交瘤细胞;d、小鼠腹腔细胞。方法:a、制备小鼠腹腔细胞。同“细胞融合”一节中的方法。b、制备待克隆的杂交瘤细胞悬液,用含20%血清的HT培养基稀释至每毫升含2.5、15和50个细胞三种不同的稀释度。c、按每毫升加入5×104-1×105细胞的比例,在上述杂交瘤细胞悬液中分别加入腹腔巨噬细胞。d、每种杂交瘤细胞分装96孔板一块,每个稀释度32孔,每孔量为0.2ml,每孔的杂交瘤细胞数分别为0.5、3和10。e、37℃
两种方法. (1) 有限稀释法 材料: a. 96孔细胞培养板等; b. HT培养基; c. 活力强的杂交瘤细胞; d. 小鼠腹腔细胞。 方法: a. 制备小鼠腹腔细胞。同“细胞融合”一节中的方法。 b. 制备待克隆的杂交瘤细胞悬液,用含20%血清的HT培养基稀释至每毫升含2.5、15和50个细胞3中不同的稀释度。 c. 按每毫升加入5×104-1×105细胞
融合”一节中的方法。 b、制备待克隆的杂交瘤细胞悬液,用含20%血清的HT培养基稀释至每毫升含2.5、15和50个细胞3中不同的稀释度。 c、按每毫升加入5×104-1×105细胞的比例,在上述杂交瘤细胞悬液中分别加入腹腔巨噬细胞。 d、每种杂交瘤细胞分装96孔板一块,每个稀释度32孔,每孔量为0.2ml,每孔的杂交瘤细胞数分别为0.5、3和10。 e、37℃、7.5% CO2湿润培养7-10天,出现肉眼可见的克隆即可检测抗体;在倒置显微镜下观察,标出只有单个克隆生长的孔,取上清作抗体
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