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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
35
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 鸭胚胎成纤维细胞 | T25瓶 | LZ-YX10591 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 人腹膜毛细血管内皮细胞完全培养基 100mL | 小鼠骨髓瘤细胞;Fox-NY 小鼠肺大静脉平滑肌细胞完全培养基 100mL |
| Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 间充质干细胞软骨分化培养基无诱导剂(即用型) 100ml | AFP-L2(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2) ELISA Kit 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2Multi-class antibodies规格: 48T |
| KIAA1279 Others Human 人 KIAA1279 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | intestinal FABP: 小肠型脂肪酸结合蛋白抗体 0.1ml |
| 散鳞镜鲤尾鳍细胞;YZ21 | Rhesus antibody Rh GIRK1 G蛋白激活内向通道1抗体 规格 0.1ml |
| 人前列腺癌低转移细胞株;PC-3M-2B4 | Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗亲和素 0.1ml |
| CM-H008人气管上皮细胞完全培养基100mL | APF(Human anti-perinuclear factor) ELISA Kit 人抗核周因子抗体 96T |
| 间充质干细胞脂肪细胞分化生长添加物MADS | Rhesus antibody Rh RMND1 减数分裂同源蛋白1抗体 规格 0.2ml |
| CL-0179P19(小鼠畸胎瘤细胞)5×106cells/瓶×2 | Anti-nectin 2/CD112/FITC 荧光素标记细胞黏附分子CD112抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| NCI-H1975 人肺腺癌细胞 | Anti-TAK1/FITC 荧光素标记转化生长因子β活化激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| T-110A透明质酸酶(含10mL酶解缓冲液)1mL | Phospho-PLK1 (Thr210): 0酸化丝/苏酸蛋白激酶Plk1抗体 0.1ml |
| PC-12(未分化) 大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤细胞(未分化) | Anti-Ku-80/FITC 荧光素标记DNA修复酶Ku-80抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T] 大鼠雪旺氏细胞完全培养基 100mL | LBP ELISA Kit 大鼠脂多糖结合蛋白 96T |
| 鸭胚胎成纤维细胞DKK1 Protein Human 重组人 DKK1 / Dkk-1 蛋白 (His 标签) | Rhesus antibody Rh Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 0酸化CREB转录共激活因子TORC1抗体 规格 0.1ml |
| SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株 | BXDC2: BXDC2蛋白抗体 0.2ml |
| 人脐带血单个核细胞 Human | Rhesus antibody Rh AQP0/MIP26 水通道蛋白0抗体 规格 0.1ml |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验一、实验器材: 手术小直剪刀三把、眼科直镊子三把、眼科弯镊子两把、玻璃平 皿三套、200目尼龙滤网、50ML、15ML离心管和手术刀片。以上物品均需要高压灭菌消毒处理。 二、实验试剂: 无Ca+2和Mg+2的PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纤维细胞(MEF)生长培养基:高糖DMEM加10%FCS。 三、实验
小鼠胚胎成纤维细胞的富集1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后,实施断颈法处死小鼠。2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮肤向后拉,暴露出腹膜。用消毒过的工具,剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开,分离后切除内脏(所有深色的东西)。将胚胎转移到(有盖)培养皿中,用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。5、用带有弯钩的眼科剪将组织剪碎,当你剪
小鼠胚胎成纤维细胞的富集 1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后,实施断颈法处死小鼠。 2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮肤向后拉,暴露出腹膜。用消毒过的工具,剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。 3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。 4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开,分离后切除内脏(所有深色的东西)。将胚胎转移到(有盖)培养
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