DEAE琼脂糖凝胶CL-6B*麦格*M6521-100ml

英文名：DEAE Sepharose CL-6B

CAS号：57407-08-6

MDL：MFCD00146630

储存条件： 2-8℃

DEAE-琼脂糖凝胶 CL-6B 是将 基乙基键合在快流速琼脂糖凝胶上形成的一种弱

阴离子交换介质，具有优异的流动性能，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及

多肽的离子交换制备。

1 理化指标

项 目 指 标

离子交换基团 -O-CH2CH2-N+

(C2H5)2H

离子交换类型 弱阴离子，可交换离子 Cl- 基质 6%交联琼脂糖

蛋白质吸附容量 120mgHSA/ml 介质

总离子交换容量 0.10~0.12 mmol/ml 介质

粒径 45~165 μm

最大流速* 150 cm/h

工作温度 4~40℃

耐压 0.015 MPa

pH 稳定性 2~14 (短时间)；3-12 (长时间)

pH 工作范围 3~9

化学稳定性

在以下液体中稳定：

常用的水相缓冲液；0.1mol/L 氢 氧/化钠；

*检测条件： 层析柱 16mm×100mm *柱床高 5cm，25℃，流动相为 0.1mol/LNaCl。

2 贮存

产品应密封贮存在 4℃~25℃（保存溶液为 20% 乙醇），通风、干燥、清洁的地方。不

能冷冻。

用过的柱子贮存在 4℃（20% 乙醇）。

3 应用

本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复

使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在 pH 工作范围内

可形成负离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及

多肽的离子交换制备。

4 使用方法

4.1 装柱

1）将所有实验材料均需平衡至进行色谱层析操作的温度；

2）实验所需要用到的缓冲液以及洗脱液进行脱气处理；

3）DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B 的储存液为20%乙醇，需要用去离子水彻底清洗掉保存液。

4）在柱子下端加入纯水装柱子，以排除气泡，将填料连续倒入柱子时，要用玻璃棒紧

靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，让填料先自然沉降到填料体积不再变化，用上样的平

衡液平衡柱后即可上样。

4.2 平衡

让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和 pH 不变。平衡液是低浓度的缓冲

溶液，如 Tris 、PBS 等。

4.3 上样

（1）样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。盐浓度太大的样品处理后

再配。

（2）一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗

下目标产品。

（3）介质对样品组分吸附的程度取决于样品的带电性质、流动相的离子强度和 pH 值。

盐浓度小，介质对样品组分吸附较牢。用 DEAE 介质时，推荐的 pH 值是至少大于目标产品

等电点 1 个单位。

4.4 洗脱

DEAE 介质可用增大盐浓度或减小 pH 值进行洗脱，常用增大盐浓度的办法洗脱。

4.5 再生

一般用高盐浓度的缓冲液（含 1~2mol/L NaCl）洗或减小 pH 洗 10 倍以上柱体积，接着

用结合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。

若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。

4.6 在位清洗

（1）对于以离子键结合上去的蛋白，可以用 2M Nacl 去除。

（2）对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类，可用 0.1M NaOH 去除。

（3）对强疏水性结合的蛋白、脂类等，用 4~10 倍柱体积的 70%乙醇或 30%异丙醇清

洗，但要注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。

清洗完毕后，用至少 10 倍缓冲液平衡柱子。

4.7 注意

在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。