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- 详细信息
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
37
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 兔眼外肌成纤维细胞 | T25瓶 | LZ-YX10515 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 | HLF-02细胞,人胚肺二倍体细胞 大鼠肝星形细胞,CFSC-3H & 5H细胞 CM-M120小鼠角膜上皮细胞完全培养基100mL |
| LRRN3 Others Human 人 LRRN3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-Gst P1/GST class-pi 谷胱甘肽硫转移酶pi基因抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| 大鼠骨髓瘤细胞;IR983F 结肠腺癌细胞,Caco-2细胞 WEHI 164细胞,鼠纤维肉瘤细胞系 | Anti-Phospho-Caspase-9 (Pry153) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠0酸化白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| PIEC(猪髋动脉内皮细胞 ) 5×106cells/瓶×2 | A1BG: α1B糖蛋白抗体 0.2ml |
| Hep G2, 人肝癌细胞系 | Rhesus antibody Rh ABHD4 α/β水解酶4抗体 规格 0.2ml |
| 子宫癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml | Rhesus antibody Rh IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11 干扰素α11抗体 规格 0.2ml |
| IL10 Protein Feline 重组猫 IL10 / Ierleukin-10 蛋白 | MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又称:MYC 致癌基因(抗原) 0.5mg |
| CL-0109HK-2(人肾小管上皮细胞)5×106cells/瓶×2 | MAGEA11: 黑色素瘤相关抗原11抗体 0.2ml |
| 家兔皮肤细胞;DR-S1 | Beta-Amyloid(1-16) β淀粉样肽1-16(多肽蛋白)Multi-class antibodies规格: 0.5mg |
| 中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24 | CGRP(Human calcitonin gene related peptide) ELISA Kit 人降钙素基因相关肽Multi-class antibodies规格: 48T |
| B16(小鼠黑色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 | HINT1: 组酸三聚体核苷结合蛋白1抗体 0.2ml |
| KMB-17细胞,人二倍体细胞系 转HLA-2基因B细胞,T2细胞 KM小鼠子瘤株;U27 | Rhesus antibody Rh FAM168A/TCRP1 舌癌化疗耐药相关蛋白1 规格 0.2ml |
| 兔眼外肌成纤维细胞大鼠骨髓瘤细胞;Y3-Ag 1.2.3 | sIgA/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗人分泌型IgA 0.1ml |
| L929细胞,成纤维细胞 人胰腺细胞,AR42J细胞 CM-R125大鼠牙细胞完全培养基100mL | AACT(Human Alpha1 Antichymotrypsin) ELISA Kit 人α1抗胰糜蛋白酶 96T |
| SK-Hep-1(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh IgG/Cy7 Cy7标记的兔抗长爪沙鼠IgG 规格 0.1ml |
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