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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
38
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠眼外肌成纤维细胞 | T25瓶 | LZ-YX10282 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| EB病毒转化的人B淋巴细胞;HH-29 人脑膜细胞完全培养基 100mL | 小鼠肉瘤瘤株;S180 |
| mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓 | KLK 10(Human Kallikrein 10) ELISA Kit 人激肽释放酶10 96T |
| MCF-7 [MCF7], 人癌细胞系 | Rhesus antibody Rh Thrombomodulin/CD141 血栓调节蛋白抗体 规格 0.1ml |
| GPC3 Others Human 人 Glypican-3 / GPC3 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254) 0酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| CD38 Others Human 人 SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-MOG /FITC 荧光素标记髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| RWPE2细胞,人前列腺上皮细胞 兔晶体上皮细胞永生系,N/N1003A(RLE)细胞 小鼠心肌细胞MCM | RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit 人抗类风湿关节炎核抗原Multi-class antibodies规格: 48T |
| HTSMC Pellet 人类气管平滑肌细胞团块 > 1 mio.cells 人脐静脉平滑肌细胞裂解物HUVSMCL | DNAJA1: 热休克蛋白相关蛋白4抗体 0.2ml |
| HREpC-c 人肾上皮细胞(HREpC) 500,000cells 人小神经胶质细胞HM | Rhesus antibody Rh IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的驴抗豚鼠IgG 规格 0.1ml |
| PDGFRB Others Human 人 CD140b / PDGFRB 人细胞裂解液 (阳性对照) | SORCS3: 液泡蛋白分选受体SORCS3抗体 0.2ml |
| RPE Others Human 人 RPE / RPE2-1 人细胞裂解液 (阳性对照) | phospho-CDH2 (Tyr820): 0酸化N-钙粘附分子抗体 0.1ml |
| TGFB1 Others Mouse 小鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 人细胞裂解液 (阳性对照) | Rhesus antibody Rh Catalase 酶抗体 规格 0.2ml |
| HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞 | Cortisol ELISA Kit 大鼠皮质醇Multi-class antibodies规格: 48T |
| 小鼠眼外肌成纤维细胞PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | FOXI1: 叉头蛋白I1抗体 0.2ml |
| 人急性单核细胞白血病细胞;THP-1 | osteopontin: 骨桥蛋白/分泌型0蛋白1抗体 0.1ml |
| 人胶质细胞(少突细胞)(HO) (1×106 ) | Anti-RAD51C/FITC 荧光素标记癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
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文献和实验Cancer Cell:中山大学刘卓炜团队揭示膀胱癌成纤维细胞新亚群介导肿瘤干性和化疗抵抗
还存在不同的细胞亚群,如高表达 IL6,LIF 等促炎因子的炎性成纤维细胞(iCAF);高表达 ACTA2 和分泌细胞外基质的肌成纤维细胞(mCAF)等【2】。因此,进一步揭示膀胱癌微环境中 CAF 亚群的异质性对深入了解膀胱癌的发生发展和治疗抵抗有重要的临床意义。 2022 年 12 月 1 日,中山大学肿瘤防治中心刘卓炜团队在 Cancer Cell 上发表题为 Interferon-Dependent SLC14A1+ Cancer-Associated Fibroblasts
表皮生长因子 epidermal growth factor
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