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- 详细信息
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
40
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 兔肾小球系膜细胞 | T25瓶 | LZ-YX10362 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人细胞裂解液 (阳性对照) | 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D2 |
| RBL-2H3(大鼠嗜碱性细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh MCM2 染色体维持缺陷蛋白2抗体 规格 0.1ml |
| 婆罗门牛皮肤成纤维样细胞;BOS-3 | STAT5(signal transducers and activators of transduction5) 信号转导和转录激活因子5(STAT5)抗原 0.5mg |
| 人肾小球内皮细胞 (HRGEC)( 5×105 ) | NYS48: NYS48蛋白抗体 0.2ml |
| tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-4B3 胰凝乳蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL | Anti-Trx/FITC 荧光素标记硫氧还蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| ICAM2 Others Human 人 CD102 / ICAM2 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-OPGL/ODF 骨保护蛋白配体抗体(破骨细胞分化因子)Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| SPG21 Others Human 人 SPG21 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-GADD34/FITC 荧光素标记生长抑制DNA损伤基因34抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| FGFR3 Others Mouse 小鼠 FGFR3 / CD333 人细胞裂解液 (阳性对照) | ASTE1: ASTE1蛋白抗体 0.2ml |
| 人非色素睫状上皮细胞 (HNPCEpiC)( 5×105 ) LX-2, 人肝星形细胞株 Human | 谷氨酸受体2C抗体 Anti-NR2C/NMDAR2C 0.2ml |
| 人胚胎膀胱组织来源细胞;CCC-HB-2 人肺动脉成纤维细胞完全培养基 100mL | Free-T3 ELISA Kit 大鼠游离状腺原酸 96T |
| INSL4 Others Human 人 INSL4 / EPIL 人细胞裂解液 (阳性对照) | Rhesus antibody Rh Slc26a5 感觉神经性耳聋常染色体隐性遗传61抗体 规格 0.2ml |
| RN-c, 大鼠皮质神经元 | Anti-ASPP2/FITC 荧光素标记P53凋亡刺激蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 兔肾小球系膜细胞PFKFB3 Others Human 人 PFK2 / PFKFB3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-PGE2/FITC 荧光素标记前列腺素E2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 人结直肠腺癌细胞;HT-29 | Human major histocompatibility complex III ,MHC III /HLA- III ELISA Kit 人主要组织相容性复合体Ⅲ类Multi-class antibodies规格: 48T |
| LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人细胞裂解液 (阳性对照) | GDE3: 促进成骨细胞分化因子抗体 0.2ml |
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