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        原代胎儿肾小球系膜细胞培养

        互联网

        1894

        取引产胎儿肾,无菌操作,1小时内完成。2用生理盐水冲洗干净。

        取肾皮质,用小外科剪剪成碎麽。依次研磨过80目,100目,200目筛网,不断用生理盐水冲洗,最后在200目筛网上收集肾小球,

        先用0。4%的胶原酶四消化半小时,接种于50ML的培养瓶里,加含有20%小牛血清的DMEM培养基放二氧化碳培养箱培养。

        三天后可在倒置镜下观察见有细胞贴壁生长。

        一周后换液一次,以后约三到四天就能长满瓶底。

        此时可常规传代,到第三代时,基本上生长的全是肾小球系膜细胞了,

        这时要进鉴定了,方法包括:常规HE染色,细胞免疫组化(小鼠抗人肌动蛋白单抗,角蛋白单抗,等),电镜(扫描,透射)。纯度达95%以上时可用于实验。

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