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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
28
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠脐静脉内皮 | T25瓶 | LZ-YX9285 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照) | 人脐动脉内皮细胞cDNAHUAEC cDNA |
| EL4.IL-2 小鼠淋巴瘤细胞 | 核呼吸因子-1抗体 |
| 人干细胞因子单克隆抗体细胞株;AMS2(SCF3) | T细胞和嗜酸性粒细胞表达特应性皮炎蛋白ETEA抗体 |
| CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | Fas相互作用蛋白激酶2抗体 |
| 人海马神经元 人肺癌细胞,NCI-H226[H226]细胞 P388D1(淋巴瘤细胞) | 细胞分裂周期相关蛋白4抗体 |
| HK-2(人肾小管上皮细胞) 5×106cells/瓶×2 MN-c, 小鼠皮质神经元 人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38] | 酸化核纤层蛋白A/C抗体 |
| NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha Protein (ECD) 人细胞裂解液 (阳性对照) | 20号染色体开放阅读框134抗体 |
| SNU-5(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 293(转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞) | γ-衔接蛋白相关蛋白3抗体 |
| FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人细胞裂解液 (阳性对照) | 膜粘连蛋白8抗体 |
| FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人细胞裂解液 (阳性对照) | 麻疹融合蛋白抗体 |
| FKBP14 Others Human 人 FKBP14 人细胞裂解液 (阳性对照) | 补体C2a链多肽抗体 |
| CL-000422RV1(人前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 | 颗粒酶K抗体 |
| 小鼠脐静脉内皮IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人细胞裂解液 (阳性对照) | 脑蛋白CG6抗体 |
| 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化);PC-12(高分化) | 白介素17受体抗体 |
| ACPP Others Human 人 ACPP / PSAP 人细胞裂解液 (阳性对照) | cornichon样蛋白抗体 |
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文献和实验三句话读懂一篇 CNS:柑橘纤维中的这种物质,可减少脂肪储存;无需药物的新止痛方法来了!
viruses。 该研究首次在 3~4 天内从人多能干细胞分化得到高纯度(>90%)的动脉和静脉内皮细胞,并将其应用于 BSL4 高致病性病毒尼帕病毒、亨德拉病毒(Hendra Virus)的研究,证明了 EFNB2 是病毒进入内皮细胞所需的受体,为血管内皮相关疾病研究提供了新的手段! 图 3:来源 Cell 4. Science:哪里疼冰哪里,新材料可给神经降温 慢性神经痛困扰着许多人的正常生活,目前无良好疗法。 2022 年 6 月 30 日,美国西北大学 John A Rogers
胶原酶:用PBS配制。(5)0.05%胰酶一0.02% 乙二胺四乙酸二钠盐(ED―TA)溶液:用D―Hanks液配制。 内皮细胞培养液:含20%胎牛血清、ECGS、肝素,100 U/m1青霉素一100 U/m1链霉素的M199培养基。(7)0.2% 明胶:用PBS配制。以上试剂均过滤除菌。 1.2.2 人脐静脉内皮细胞的分离与原代培养: 参照Jaffe 和Lin S等方法并加以改进。在无菌条件下取新生胎儿脐带,长度>20 cm。剪去脐带两端和脐带上有夹痕及血肿部分,尽量挤干净脐带内血液。用生理盐水冲洗脐带
总数量、原代培养时间方面均优于Ficoll分离法。 根据我们的经验在培养过程中需注意几点: 1 接种密度要足够高。 2 培养基要偏酸性, 抑制其他造血细胞的生长。 3 通过传代可以逐渐达到纯化的目的, 在传2代后, 细胞纯度多可以达到95%以上, 有条件可以应用间充质专用培养基。 4 首次换液时间7 d 脐血中MSCs比例低;UCB—MSCs体外培养影响因素相对复杂,如随着孕龄增长,脐血中的MSCs大部分定位于脐带静脉内皮下层和胎盘基质,而外周循 环
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