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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
35
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠阴道真皮成纤维细胞 | T25瓶 | LZ-YX10046 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| PVR Others Human 人 PVR / CD155 / NECL5 人细胞裂解液 (阳性对照) | 团头鲂尾鳍细胞;WCF |
| 豚鼠心肌细胞;GP-H1 | 先天性眼外肌纤维化相关蛋白FEOM2抗体 |
| TDGF1 Protein Human 重组人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 标签) | 细丝蛋白3抗体 |
| HuTu-80(人十二脂肠腺癌) 5×106cells/瓶×2 宋内氏志贺氏菌(Sh.sonnei) | 小肠型脂肪酸结合蛋白抗体 |
| F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO细胞裂解液 (阳性对照) | 轴突相关粘附分子抗体 |
| MRC-5细胞,人正常胚肺成纤维细胞 人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移),KP-N-NS细胞 人脉络丛成纤维细胞HCPF | 巨噬细胞炎症因子1α抗体 MIP-1α |
| HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) | 肿瘤/抗原65 |
| CD27 Others Mouse 小鼠 CD27 / TNFRSF7 人细胞裂解液 (阳性对照) | 间隙连接蛋白47抗体 |
| DLL4 Others Mouse 小鼠 DLL4 / Delta4 人细胞裂解液 (阳性对照) | BCL2样10促凋亡蛋白抗体 |
| SEMA6A Others Human 人 Semaphorin-6A / SEMA6A 人细胞裂解液 (阳性对照) | 神经生长因子β抗体 |
| CDH18 Others Cynomolgus 食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 人细胞裂解液 (阳性对照) | Hsp90辅助伴侣分子CDC37抗体 |
| CM-R029大鼠肠平滑肌细胞完全培养基100mL | 硫酸乙酰肝素6脑苷脂转硫酸酶1抗体 |
| 大鼠阴道真皮成纤维细胞TP63 Others Human 人 P63 / TP63 / Tumor 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 1号染色体开放阅读框85抗体 |
| 人导管癌细胞;ZR-75-1 | 亮氨酸羧基甲基转移酶1抗体 |
| LIFR Others Rat 大鼠 LIFR 人细胞裂解液 (阳性对照) | 型乙酰胆碱受体α7抗体 |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验实验材料: 1. 正常动物皮肤 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2 3. 细胞培养瓶(T25) 4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 实验方法: 1. 取正常动物皮肤,置于小培养皿内,用PBS漂洗3-4次,以除去表面血污及毛发; 2. 将洗净的组织用眼科剪剪切成1mm3 左右大小,再用PBS漂洗3次; 3. 用眼科剪将组织块移至培养瓶瓶壁
美少女福音!Science 重磅报道,他们率先实现皮肤无疤痕愈合
增殖的可能。 图片来源:Science 随后,作者也通过标记位于皮肤不同位置的 ENFs,识别出了是位于皮肤深处真皮网状层的 ENFs 被激活产生了 EPFs。 图片来源:Science 在弄清楚 EPFs 的来源后,研究团队探究了是什么导致 ENFs 被激活产生了 EPFs。 由于存在于纤维组织中并负责纤维的改造与产生,成纤维细胞能够感受到纤维组织的力学特性,所以作者认为是受伤后皮肤力学性质的改变,导致了 EPFs 的激活。 通过在不同刚度的模拟组织中培养 ENFs 以及使用抑制剂阻断力学信号
min。6、洗涤:1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次 × 15 分钟,晾干。7、标记性抗体:加入荧光标记抗体,37℃孵育30min。洗涤:1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次 × 15 分钟,晾干。8、封片:封片剂封片。9、镜检:荧光显微镜下观察。六、注意事项1、选材注意时要将皮肤组织上的被毛去除干净,也可以使用还未长出被毛的乳鼠进行试验。2、注意尽量将皮片剪成(3-5)mm ×(10-15)mm大小,如太大则不利于消化,太小则不利于真皮、表皮的物理分离。3、过度消化损伤严重影响成纤维细胞
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