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- 供应商:
上海联祖
- 库存:
42
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 人视网膜muller细胞 | T25瓶 | LZ-YX9936 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| PC-2细胞,人胰腺癌细胞 人皮肤癌细胞系,HS-4细胞 小鼠黑色素瘤瘤株;B16 | 肾实质细胞Many types of cells包装:5 ×105次方(1ml) |
| 人脑干星形胶质细胞HA-bs | 脯氨酸脱氢酶抗体 |
| 人脑成纤维细胞完全培养基 100mL | 锌指蛋白FYCO1抗体 |
| CNE-2Z细胞,人鼻咽癌母系细胞 小鼠骨髓瘤细胞,SP2/0细胞 恒河猴肾细胞;RM-1 | 白介素9抗体 |
| CEACAM1 Others Human 人 CEACAM1 / CD66a 人细胞裂解液 (阳性对照) | 氯霉素单克隆抗体 |
| TNFSF12 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 人 TNFSF12 人细胞裂解液 (阳性对照) | 多纤毛素蛋白抗体 |
| B16-F10小鼠皮肤黑色素瘤细胞 B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培养基+10%FBS | 22号染色体开放阅读框29抗体 |
| PDGFC Others Human 人 PDGF-C 人细胞裂解液 (阳性对照) | 酸化γ1氨基受体GABAA Rβ1抗体 |
| ARSA Others Mouse 小鼠 ARSA 人细胞裂解液 (阳性对照) | BRD2蛋白抗体 |
| HPAEC-c 人肺动脉内皮细胞(HPAEC) 500,000cells 颅盖造骨细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | 核纤层蛋白A识别因子抗体 |
| IFNA2 Others Mouse 小鼠 IFNA2 / Ierferon alpha 2 人细胞裂解液 (阳性对照) | 死亡相关蛋白5抗体 |
| CM-M015小鼠胰岛细胞完全培养基100mL | 同源盒蛋白PRH抗体 |
| 人视网膜muller细胞CTNNB1 Others Mouse 小鼠 beta-Catenin / CTNNB1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | CD93抗体 |
| 人Burkkit淋巴瘤细胞;Daudi | 酸化肠道内富含的Kruppel样因子5抗体 |
| SEMA4A Others Human 人 SEMA4A / Semaphorin-4A 人细胞裂解液 (阳性对照) | 11号染色体开放阅读框74抗体 |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验视网膜母细胞瘤是起源于视网膜的胚胎性的眼内恶性肿瘤。本病与遗传、染色体畸变、病毒感染有关。患者90%为3岁以内婴儿,少数发生于大龄儿童,偶见成人。无种族及性别差异。多单眼发病,约占70%,双眼同时或先后发病者约为30%。双眼发病者全部及单侧患者中的10—15%多具有遗传性,属常染色体显性遗传,外显率不全,故表面正常,带有致病基因的父母不一定发病,但可以有患病的子女。在我国有家族史者占2.5%—3.5%。染色体研究也证明部分患者有染色体的异常,发现13号染色体长臂缺失或基因
吸出培养瓶中的培养基,用PBS液洗涤1-2次; 加入已经在37度预热的消化液(0。25%胰酶+0。02%EDTA)少量(估计可以平铺培养瓶底部即可); 在镜下看到细胞退缩变园,立即给予少量培养基终止消化,我一般的消化时间就在1分钟之内很好消化; 再用弯管吹打细胞成单细胞悬液后,按1:2或1:3分瓶即可。
,并用眼科小剪子剪去视乳头周围的视网膜及血管; ③ 用PBS液稍洗,去除黏附的色素上皮细胞。置于盛有平衡盐溶液的培养皿中; 2. 取自兔的供体眼球:当取出视网膜组织后,在解剖显微镜下用眼科小剪刀剪去髓放线部分及血管。 二、原代培养 1. 在处理完毕的视网膜组织中加入胰蛋白酶和透明质酸酶混合消化液,于37℃调间隙消化30min; 2. 用有血清培养液终止消化。经吹打后,将细胞悬液离心(800r/min)5min; 3. 用培养液重新悬浮细胞,并吸走絮状的纤维样物质
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