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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
30
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠大隐静脉平滑肌细胞 | T25瓶 | LZ-YX9716 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 人小胶质细胞裂解物HML | 人胃癌细胞;MGC-803 大鼠胎儿表皮角质形成层细胞完全培养基 100mL |
| SK-OV-3细胞,卵巢癌细胞 人胃癌细胞系,HS-746T细胞 豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM4 | Wnt信号受体FZD2蛋白抗体 |
| FCGR1 Others Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 人细胞裂解液 (阳性对照) | 蜜蜂微孢子虫蛋白抗体 |
| 滑膜细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) | 核糖体蛋白S3抗体 |
| CL-0041BT-549(人管癌细胞)5×106cells/瓶×2 | 细胞纤毛内转运同源蛋白80抗体 |
| IL12A Protein Human 重组人 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 标签) | 凋亡加强结构域蛋白11抗体 |
| CL-0308TE-13(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×2 | 上腺素能受体β2抗体(β2-AR ) |
| 人内根壳细胞RNAHHIRSC miRNA5 μg | 类状瘤病毒58 E6蛋白抗体 |
| CL-0229T84(人结肠腺癌肺转移细胞)5×106cells/瓶×2 | 远端上游元件结合蛋白3抗体 |
| CL-0317AML-193(人急性单核细胞白血病单核细胞)5×106cells/瓶×2 | 波形蛋白抗体 |
| MA-891(小鼠癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 | 驱动蛋白KNS1抗体 |
| QBC939细胞,人胆管癌细胞 褐鼠胰岛素瘤上皮细胞,RIN-m细胞 NIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系 | 钾离子通道蛋白家族成员3抗体 |
| 大鼠大隐静脉平滑肌细胞A-375(人恶性黑色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 | 血管内皮生长因子A抗体 |
| SH-77细胞,小细胞肺癌 人T细胞白血病细胞,T-CEM细胞 人T淋巴瘤转基因细胞;Jurkat D,E | 钙粘蛋白15抗体 |
| Hepa 1-6 小鼠肝癌细胞 | 铁蛋白轻链抗体 |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验贴壁法: 器械 显微器械:眼科剪一把,直弯眼科镊各一把,细结镊一把,手术刀一把,针头诺干 杀老鼠器械:手术剪一把,大镊子一把,弯眼科镊一把,组织钳一把,50ml烧杯一个(锡纸包好) 另外:10ml离心管两个,培养皿两个,10ml的瓶子三个,小滤器两个,硅胶板一块,培养瓶盖子诺干 贰。试剂 D-HANKS液250ml,双抗2ml(青霉素16万U/ml链霉素15万U/ml)。FBS和含20%FBS的DMEM 叁。步骤 1. 取大鼠,称重,水合
我养了快半年的大鼠气道平滑肌细胞,有一点体会,特发上来和各位战友交流一下,互相进步。 壹. 器械 显微器械:眼科剪一把,直弯眼科镊各一把,细结镊一把,手术刀一把,针头诺干 杀老鼠器械:手术剪一把,大镊子一把,弯眼科镊一把,组织钳一把,50ml烧杯一个(锡纸包好) 另外:10ml离心管两个,培养皿两个,10ml的瓶子三个,小滤器两个,硅胶板一块,培养瓶盖子诺干 贰。试剂 D-HANKS液250ml,双抗2ml(青霉素16万U/ml链霉素15万U/ml),一型胶原
PriCells –正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit6、检测试剂:肌动蛋白
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