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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
35
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠皮层神经元细胞 | T25瓶 | LZ-YX9643 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| IL4R Others Human 人 IL4R / CD124 人细胞裂解液 (阳性对照) | 人心肌细胞总RNAHCM NA |
| 人膀胱平滑肌细胞完全培养基 100mL | 酸化6酸果糖激酶抗体 |
| 斑马鱼尾鳍细胞;AB.9 | 雌激素受体α抗体 |
| IFNB1 Others Human 人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB 人细胞裂解液 (阳性对照) | 白细胞介素28B抗体 |
| CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人细胞裂解液 (阳性对照) | 原癌基因cMAF抗体 |
| SP2/0小鼠骨髓瘤细胞 Mouse myeloma cell line SP2/0 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 甲基化多聚腺苷酸结合蛋白抗体 |
| HDLEC Pellet 人类皮肤淋巴管内皮细胞团块(少年者) > 1 mio.cells 少突胶质前体细胞生长添加物OPCGS | 9号染色体开放阅读框116抗体 |
| HDMEC adult Pellet 人真皮微血管内皮细胞团块(成年捐献者) > 1 mio.cells 小气道上皮细胞培养基 | 胰高血糖素受体抗体 |
| EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9402 人大隐静脉内皮细胞完全培养基 100mL | ABC膜转运蛋白抗体 |
| 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293);APP-PS1 人支持细胞完全培养基 100mL | 核因子活化T细胞胞浆蛋白2抗体 |
| MRPL44 Others Human 人 MRPL44 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 0脂蛋白受体Dab1抗体 |
| CL-0365HuTu-80(人十二脂肠腺癌)5×106cells/瓶×2 | 错构素蛋白抗体 |
| 大鼠皮层神经元细胞CDH2 Others Mouse 小鼠 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人细胞裂解液 (阳性对照) | 8号染色体开放阅读框48抗体 |
| 间充质干细胞生长添加物-无动物成分MSCGS-acf | 酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体 |
| LAMP2 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP2 人细胞裂解液 (阳性对照) | 3号染色体开放阅读框70抗体 |
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文献和实验+20%FBS)并吹打成单细胞悬液。7、细胞计数,调整细胞密度按1.5×105/cm2种入6孔板内,放入CO2孵箱中培养。培养48h后换液并加入Ara-C使其终浓度为1×10-5mM/L。Ara-C作用24h后全量换液。以后每隔3天半量换液一次。【注意以下几点】1、上面的步骤是传统方法。有许多地方可以进行改动:如消化时可以直接用0.125-0.25的胰酶消化15-20min左右,也可用DNA酶进行消化,有人还直接进行吹打,都可行。2、上面虽然时大鼠皮层神经元,但是同样适用于小鼠,但是应该选择 孕
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