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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
30
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 小鼠滑膜成纤维细胞 | T25瓶 | LZ-YX9326 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 人羊膜细胞;WISH | CL-0352HFF-1(人成纤维细胞)5×106cells/瓶×2 |
| B16-Fo细胞,鼠黑色素瘤细胞系 WI-38(胚肺细胞) 人晶体上皮细胞永生系;SRA01/04(HLE) | 氨基末端激酶3抗体 |
| CPM Others Human 人 CPM / Carboxypeptidase M 人细胞裂解液 (阳性对照) | 内收蛋白抗体 |
| 罗猴胎肾细胞;MA104 | 环子孢子蛋白(约氏疟原虫)抗体 |
| AsPC-1 人转移胰腺腺癌细胞 | 腺苷酸环化酶4抗体 |
| RLF, 大鼠淋巴成纤维细胞 Rattus | 泛素蛋白连接酶2N抗体 |
| CL-0424RK1(大鼠肾细胞)5×106cells/瓶×2 | 瞬时受体电位离子通道蛋白6抗体 |
| 小鼠肠微血管细胞完全培养基 100mL | 酸化Smad2抗体 |
| 猕猴皮肤细胞;MMS7 | 脂肪酸合成酶抗体 |
| HT1080 人成纤维瘤细胞 | 促甲状腺素受体抗体(C端) |
| IL10 Protein Feline 重组猫 IL10 / Ierleukin-10 蛋白 | 软骨蛋白1抗体 |
| 293LVT人胚肾细胞--用于慢病毒包装 293LVT human embryonic kidney cells -- for leiviral packaging DMEM(GIBCO:11995)+10% FBS(GIBCO)+1%NEAA+200mM L-glutamine | 巨细胞病毒单克隆抗体 |
| 小鼠滑膜成纤维细胞PIEC(猪髋动脉内皮细胞 ) 5×106cells/瓶×2 | 胰岛素样生长因子结合蛋白4抗体 |
| NCI-H460细胞,人大细胞肺癌细胞 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化),PC-12细胞 CM-R007大鼠支气管上皮细胞完全培养基100mL | 宫颈癌原基因1/bri3结合蛋白抗体 |
| MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 | 维甲酸相关孤儿受体α抗体 |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验小鼠胚胎成纤维细胞的富集1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后,实施断颈法处死小鼠。2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮肤向后拉,暴露出腹膜。用消毒过的工具,剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开,分离后切除内脏(所有深色的东西)。将胚胎转移到(有盖)培养皿中,用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。5、用带有弯钩的眼科剪将组织剪碎,当你剪
小鼠胚胎成纤维细胞的富集 1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后,实施断颈法处死小鼠。 2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮肤向后拉,暴露出腹膜。用消毒过的工具,剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。 3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。 4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开,分离后切除内脏(所有深色的东西)。将胚胎转移到(有盖)培养
实验材料: 1. 肾组织:取自8周龄健康雌性小鼠; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 0.1%明胶:为生长基质成分,在取材前先用它包被培养瓶的生长面; 4. 消化液:0.1%胰蛋白酶溶液; 5. 培养液:DMEM培养液,补充20%的胎牛血清、成纤维细胞生长因子(α-FGF)2µg/ml、庆大霉素100µg/ml、青霉素100IU/ml、链霉素100µg/ml; 6. 用于细胞
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