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- 康瑞纳
- 进口/国产
- LC17985
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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Inert atmosphere,2-8°C
- 保质期：
2年
- 英文名：
1,3-Dimethylimidazolium Dimethyl Phosphate
- 库存：
999
- 供应商：
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号：
654058-04-5
- 规格：
5g
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文献和实验3) 用50mmol/L pH值7.0 PBS结合缓冲液平衡上述亲和层析柱。 4) 加入步骤2中滤过的Fab片段抗体粗制品于柱中，反复循环30min至1h。 5) 加5~10ml 10mmol/L pH值6.8的PBS预洗缓冲液，洗去非特异性吸附蛋白。 6) 加入8ml 100mmol/L pH值2.7的甘氨酸盐酸缓冲液洗脱结合的Fab片段蛋白，每管收集1ml。 7) 于收集管中加入50~80μl 1mol/L pH
3.5，会导致镍离子脱落 策略：改变洗脱办法，咪唑竞争性洗脱 可能原因：蛋白已沉淀在柱上 策略：减少上样量，或使用咪唑的线性梯度而不是分步洗脱以降低蛋白的浓度。试用去污剂或改变NaCl 的浓度，或在变性条件( 去折叠) 下洗脱( 用4-8 M 脲，或4-6 M 盐酸胍)。 可能原因：非特异性疏水或其他相互反应 策略：加非离子去污剂到洗脱缓冲液(如：2% Triton X-100)或增加NaCl 的浓度。 His 标签蛋白洗脱后杂带
性比活度可高达2×1010计数/（min·mg）。寡核苷酸探针的非放射性标记时，可用以下几种方法：1．酶延伸法合成与探针目的基因的3’-端一段互补的寡核苷核序列，此序列的5’-端多加一个A，与目的基因片段退火，再用Klenow酶延伸，使bio –dUTP掺入探针的3’末端。2．5’磷酸末端标记法带5’-磷酸的寡核苷酸探针，在咪唑缓冲液中用水溶性碳二亚胺（EDC）处理，可生成活性的磷酸咪唑中间体，与过量的乙二胺作用，就可以引入一个带氨基的接臂。用活化生物素标记就可以得到5’-磷酸标记的寡核苷酸探针。3．酶标
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