布雷非德菌素 A（BFA） 20350-15-6

布雷非德菌素 A（BFA） 20350-15-6 布雷非德菌素 A（BFA） 20350-15-6
产品名称：布雷非德菌素 A（BFA） 20350-15-6
产品编号：A1399
中文别称 BFA；布雷非德菌素 A（BFA）；布雷非德菌素 A
英文别称 Brefeldin A
CAS 20350-15-6
分子式 C16H24O4
分子量 280.36
储存条件 -20℃
有效期 2年
溶解性 4mg/ML in DMSO
来源 Eupenicillium brefeldianum
纯度 ≥98%
包装 瓶
规格 5mg

Brefeldin A是一种内酯类抗生素，起源于真菌，能够抑制蛋白质从内质网向高尔基体的转运。据报道，它作用于名为GBF1的鸟嘌呤核苷酸交换因子，该因子介导运输小泡的形成，未折叠的蛋白质反应可导致一些细胞凋亡。

Brefeldin A是一种真菌代谢产物，抑制内质网和高尔基体之间的传输，Brefeldin A导致膜蛋白分布受损。Brefeldin A处理HCT 116人结肠癌细胞，观察到形态学的变化，表示细胞分化。Brefeldin A作用于肿瘤细胞，主要通过诱导分化和凋亡而发挥其细胞毒性作用。20 μg/mL Brefeldin A处理检测条6小时，在10mM Indomethacin 和 30 μM L-NOARG存在时，完全废除Bradykinin诱导的松弛。浓度为1 nM 到 1 mM之间的 20 μg/mL Brefeldin A处理，废除Bradykinin诱导的[Ca2+]i降低。Brefeldin A作用于内皮细胞，对Bradykinin 或 Substance P诱导的[Ca2+]i 提高没有影响。Brefeldin A 不影响GTPS与myr-rARF1的自发磷脂依赖性的结合，但完全废除视网膜等渗提取物（RIE）的催化交换，2 μM Brefeldin A的半抑制浓度为2 μM。Brefeldin A 抑制多种膜转运途径。Brefeldin A作用于高尔基体膜或脑细胞质，抑制ADP-核糖基化因子特定的鸟嘌呤核苷酸交换活性。Brefeldin A完全抑制说明视网膜提取物包含ARF特定的鸟嘌呤核苷酸交换因子。Brefeldin A只部分抑制ADP-核糖基化因子（ARFs）释放的视网膜等渗提取物（RIE）催化的GTPS，即使浓度高达300 μM时。Brefeldin A诱导高尔基体与ER融合。Brefeldin A废除 CERT 抑制剂HPA-12的抑制效果。Brefeldin A处理CHO细胞，使鞘磷脂的合成提高2到3倍。除了B-CLL细胞，Brefeldin A还造成多发性骨髓瘤（U266，NCI-H929），JURKAT，HeLa细胞，白血病（HL60，K562，BJAB），结肠（HT-29），和前列腺，及腺样囊性瘤细胞发生凋亡。25 ng/mL Brefeldin A处理 HF4.9 和 HF28RA 细胞，完全抑制细胞生长，而要完全抑制HF1A3 细胞生长则需要高剂量的Brefeldin A (75 ng/mL) 。50-75 ng/mL Brefeldin A 处理HF1A3, HF4.9 和 HF28RA细胞，24小时内抑制细胞增殖，这种作用存在剂量依赖性，3H-胸甘的渗透几乎完全停止，50 ng/ml处理时，HF1A3, HF4.9 和 HF28RA细胞分别抑制26%, 76%, 87%，75 ng/mL处理时，HF1A3, HF4.9 和 HF28RA细胞分别抑制75%, 87%, 92%。YO-PRO 1/PI检测中，Brefeldin A诱导细胞死亡，这种作用存在剂量依赖性。

溶解性：DMSO 4 mg/mL，水<1 mg/mL，乙醇 <1 mg/mL
稳定性：2年 -20°C粉状，6月-80°C溶于DMSO
描述 Brefeldin A是一种内酯抗生素,是蛋白质运输的特定抑制剂。也是一种autophagy和 mitophagy 抑制剂。还是一种 CRISPR/Cas9 激动剂,可抑制 HSV-1病毒,并具有抗癌活性。(Brefeldin A is a lactone antibiotic and a specific inhibitor of protein transport. It is also an autophagy and mitophagy inhibitor. It is also a CRISPR/Cas9 agonist, which can inhibit HSV-1 virus and has anticancer activity.)
靶点 Autophagy; CRISPR/Cas9; Mitophagy; HSV; Antibiotic
通路 Autophagy;Apoptosis; Anti-infection
生物活性 Brefeldin A是蛋白质运输 (protein trafficking) 的特异性抑制剂，其阻断蛋白质从内质网向高尔基复合体的转运。[1-5]

In Vitro
布雷菲德菌素A治疗15小时或40小时，引起内质网（ER）的显著肿胀并将其定位转移至正常大鼠肾（NRK）细胞的外周。延长的布雷菲德菌素A治疗导致MT和肌动蛋白细胞骨架的显著破坏[1]。 BARS的ADP-核糖基化通过在布雷菲德菌素A和ADPR之间形成缀合物来介导。当与来自BFA处理的CD38 + HeLa细胞的培养基一起孵育时，BARS显示BAC结合[2]。 Brefeldin A在MDA-MB-231乳腺癌细胞中诱导不依赖贴壁的细胞死亡，抑制3D和2D培养物中MDA-MB-231集落的形成，并抑制MDA-MB的迁移和MMP 9（Matrix Metallopeptidase 9）活性-231 [3]。

细胞实验
将细胞在玻璃盖玻片上生长，在PBS中的3％多聚.甲醛中固定（在室温下10分钟），然后在PBS中洗涤。在室温下用PBS中的0.01％Triton X-100透化细胞7分钟。将盖玻片洗涤（在PBS/0.2％吐温中3次），在PBS/O.4％鱼皮明胶/0.2%吐温（5分钟）和PBS/2.5％山羊血清/0.2%吐温（5分钟）中孵育。 。封闭后，将细胞与一抗在37℃温育45分钟，然后用PBS/0.2％吐温洗涤（5次，每次5分钟）。在37℃下加入第二抗体30分钟，然后如上洗涤细胞。将盖玻片以9：1甘油/ PBS与0.1％邻苯.二胺的载玻片安装在载玻片上。

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