- ￥120 - 720
- 康瑞纳
- 进口/国产
- R2740
- 2025年10月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
RT/2-8℃/-20℃
- 保质期：
3年
- 英文名：
CCK-8 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
- 库存：
999
- 供应商：
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号：
152-1055-9202
- 规格：
100t/500t/1000t
| 规格： | 100t | 产品价格： | ￥120.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500t | 产品价格： | ￥450.0 |
| 规格： | 1000t | 产品价格： | ￥720.0 |
CCK-8 CCK-8 试剂盒(细胞增殖及毒性检测试剂盒) CCK-8试剂盒(细胞增殖及毒性检测试剂盒)
产品名称：CCK-8试剂盒(细胞增殖及毒性检测试剂盒)
产品编号：R2740
中文别称 CCK-8 WST-8；CCK-8；CCK-8
英文别称 CCK-8 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
储存条件 4℃密封避光保存
包装 瓶
规格 100T 500T 1000T
Cell Counting Kit-8 简称CCK-8 试剂盒，为MTT 法的替代方法，是一种基于WST（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。
使用说明：
一、制作标准曲线（测定细胞具体数量时 （测定细胞具体数量时）
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。
2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做 3-5 个细胞浓度梯度，每组 3-6 个复孔。
3、接种后培养至细胞贴壁，然后加 CCK-8 试剂培养一定时间后测定 OD 值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X 轴），OD 值为纵坐标（Y 轴）的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入 CCK-8 后的培养时间。）
二、细胞活性检测
1、在 96 孔板中接种细胞悬液（100µL/孔）。将培养板放在培养箱中预培养（在 37℃,5% CO2 的条件下）。
2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数）。
3、将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
4、用酶标仪测定在 450nm 处的吸光度。
5、如果暂时不测定 OD 值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在 24 小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增值-毒性检测
1、在 96 孔板中配置 100 µL 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时（在 37 ℃，5% CO2 的条件下）。
2、向培养板加入 10µL 不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24 或 48 小时）。
3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数）。如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加 CCK-8 之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。
4、将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。
5、用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
6、如果暂时不测定 OD 值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在 24 小时内吸光度不会发生变化。
活力计算：.
细胞活力（％）=[A(加药)－A(空白)]／[ A(0 加药)－A(空白)]×100
A（加药）：具有细胞、CCK-8 溶液和药物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培养基和 CCK-8 溶液而没有细胞的孔的吸光度
A（0 加药）：具有细胞、CCK-8 溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力
注意事项：
①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养时间。
②白细胞可能需要培养较长时间。
③当使用标准 96 孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为 1 ,000 个/孔 (100 µL 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于 2,500 个/孔 ( 100 µL 培养基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的 10% 加入 CCK-8 溶液。
④如果没有 450nm 的滤光片，可以使用吸光度在 430-490 nm 之间的滤光片，但是 450nm 检测灵敏度最高。
⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。
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文献和实验Ren L, Liu J, Liu C, Yang T, Wu X, Zhang X, Yang L, Xia J, Li W. AIn Vitro Cell（RAW264.7 cells；100 ng/mL LPS，24 h at 37 °C） RAW264.7 cells were seeded in confocal dishes at a density of 1 × 105 cells per dish. After the culture of 24 h, cells were treated with 100 ng/mL LPS in different media, including a control medium, PACDFe extract, and PACDFe hydrogel extract supplemented with 1 μM LL-37 for another 24 h at 3011 °C. 更多文献信息请详询客服
一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
CCK-8较MTT法测定细胞增殖/毒性实验，步骤更简便，灵敏度更高，重复性更好 第一 从基础操作方面对比 CCK-8 方法 MTT方法 1 还原后的甲�物为水溶性，不需要溶解 还原后的甲�物位非水溶性的，需要有机溶剂溶解
在细胞培养实验过程中，大家是不是总会好奇别人家的实验总是做的又快又好，而自己做的实验又慢又难得做出自己满意的结果，搞得一天到晚也挺忙的，心想：我也很努力很认真啊，为啥效率总提不起来呢？其实，有时候并不是自己不努力，只是没有找对方法。做实验可不能光是埋头苦干，还要学会运用合适的检测试剂盒，这样就能事半功倍。如果你还在用 MTT，那就真的 OUT 了，MTT 花 4 小时才能得到的结果用 CCK-8 只需 1 小时，CCK-8 可用于细胞增殖和毒性分析，同 MTT 法相比，CCK-8 即开即用
