细胞融合用PEG(杂交瘤融合验证通过)

细胞融合技术（杂交瘤技术）

,得到的一部分融合杂交细胞既能继续生长,又能分泌抗羊红细胞抗体,将这种杂交细胞系统称为杂交瘤,应用这种方法可制备单一抗原决定簇的单克隆抗体. 事实上在此之前,1970年Sinkovics等人已经报导过产生特异性病毒抗体的淋巴细胞和由病毒引起的肿瘤细胞可以自然地在体内形成杂交瘤分泌特异性抗体.1973年Schwaber与Coken首次报导了鼠－人杂交瘤的成功.1974年Bloom与Nakamura首次应用人的B细胞与人的骨髓瘤细胞融合产生淋巴因子.以后于1980年Luben与Molle证明,在体

通过细胞融合得到B细胞杂交瘤实验

相关专题   基本原理 分泌抗体的激活B细胞与骨髓瘤细胞融合，才能生成具有亲体细胞两方面特性即既可产生抗体又可在体外无限繁殖的杂交瘤细胞，因此，细胞融合是单克隆抗体制备的中心环节。细胞融合的方法多采用化学助融法，最常用的化学助融剂为聚乙二醇（Polyethylene glycol, PEG），分子量100-4000的PEG助融效果最好，对细胞的毒性相对小。此外，还可利用电融合等物理方法，在亲本细胞的情况西很有适宜

PEG介导的动物细胞融合技术

。 利用PEG介导细胞融合, 其融合效果受以下几种因素的影响。1. PEG的分子量与浓度: 细胞融合效果与PEG的分子量及其浓度成正比；但PEG的分子量越大、浓度越高, 对细胞的毒性也就越大。为了兼顾二者，在实验时常常采用的PEG分子量一般为1000~4000，浓度一般为40~60%。2. PEG的pH值: 经验证，PEG的pH值在8.0~8.2之间融合效果最好。3. PEG的处理时间: 处理时间越长，融合效果越好, 但对细胞的毒害也就越大。故一般将处理时间限制在1分钟之内。本实验中细胞融合