胶体金标记-小鼠抗乙肝表面抗原

免疫金电镜分析

的功能区，该区域抗原很少，提示此抗体可能与不育关系密切．该研究应用免疫金标记法，进行了抗51KD抗体在精子的免疫电镜定位，并获得较为满意的结果.为与男性不育相关的精子抗原及其抗体的研究提供了可行方法，对男性不育症患者的诊断及治疗提供了可靠依据。 (2)通过免疫电子显微镜可以观察到，喹啉衍生物(QUIN)在人体细胞代谢中的重要作用．银增强的胶体金方法结合电镜用于免疫分析测定细胞中的QUIN可获得很好的效果，金颗粒的数目代表了QUIN免疫活性．随着QUIN浓度水平的提高,金颗粒的标记位置不变

胶体金标记物的制备

胶体金标记蛋白质的原理，一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时，蛋白质呈电中性，此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小，但蛋白质分子的表面张力却最大，处于一种微弱的水化状态，较易吸附于金颗粒的表面。由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面，形成一个蛋白层，阻止了胶体金颗粒的相互接触，而使胶体金处于稳定状态，如果＝低于蛋白质的等电点时，蛋白质带正电荷，胶体金带负电荷，二者极易静电结合形成大的聚合物。如果pH高于蛋白质等电点时，蛋白质带负电荷，与金颗粒的负电荷相互排斥而不能互相

包埋前免疫纳米金单重染色

免疫纳米金染色与免疫胶体金―银法染色基本相似，也可分为包埋前染色和包埋后染色。下面分别介绍包埋前免疫纳米金单重染色和与免疫酶染色结合的双重染色基本程序： 包埋前免疫，纳米金单重染色按以下步骤进行免疫染色： 1. 含1％正常血清或1%BSA的PBS预孵育20～30分钟； 2. 特异性第一抗体4℃孵育24～48小时后PBS漂洗3次，每次10分钟； 3. 纳米金标记IgGFab，片段(1：100，Nanoprobes)室温孵育2小时或4℃孵育12小时后PBS漂洗3次，每次10