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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
35
- 英文名:
Active Fibroblast Growth Factor 14 (FGF14)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 人成纤维细胞生长因子14(FGF14)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7522 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Homo sapiens (Human,人) 。 |
英文别名:FHF4; SCA27; Fibroblast growth factor homologous factor 4
物种:Homo sapiens (Human,人) 。
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:-
应用:Cell culture; Activity Assays.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 组蛋白H3样抗体 Anti-Centromeric histone H3-like protein-1 WB IHC-P IHC-F IF | BST1重组大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 人类乳头状瘤病毒18 E6抗体 Anti-HPV18 E6 protein WB IHC-P IHC-F IF | galectin 9 半乳糖凝集素9(抗原 0.5mggalectin 9 半乳糖凝集素9(抗原) |
| 人类乳头状瘤病毒16-E7抗体 Anti-HPV16-E7 WB IHC-P IHC-F IF | CPLX2重组人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白 (His 标签) Protein |
| 核基质p84蛋白抗体 Anti-Nuclear Matrix Protein p84 WB IHC-P IHC-F IF | C1D Protein Human 重组人 C1D 蛋白 (GST 标签) |
| 组蛋白H3样抗体 Anti-Centromeric histone H3-like protein-2 WB IHC-P IHC-F IF | IL6ST Protein Mouse 重组小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 (His 标签) |
| Western Blot转膜液(粉剂),仅供科研 | CXCL9重组小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白 Protein |
| X线暗盒,仅供科研 | SPINT1 Protein Human 重组人 HAI-1 / SPINT1 蛋白 (His 标签) |
| X光胶片,仅供科研 | MFAP5重组人 MFAP5 / MAGP2 蛋白 (His 标签) Protein |
| Western洗涤液,仅供科研 | PTPN1 Protein Human 重组人 PTP1B / PTPN1 蛋白 (His 标签) |
| Western二抗稀释液,仅供科研 | NMNAT1重组人 NMNAT1 / NMNAT 蛋白 (His 标签) Protein |
| 蛋白激酶A2抗体 Anti-AKAP2 WB IHC-P IHC-F IF | M2-PK ( pyruvate Kinase M2 0.5mgM2-PK ( pyruvate Kinase M2) 酸激酶-M2(抗原) |
| 发育分化增强因子1抗体 Anti-ASAP1 WB IHC-P IHC-F IF | FCGRT & B2M Protein Mouse 重组小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 |
| 蛋白激酶B3 Anti-AKT3 WB IHC-P IHC-F IF | HIST3H2A Protein Human 重组人 HIST3H2A / Histone H2A 蛋白 |
| 磷酸化发育分化增强因子1抗体 Anti-phospho-ASAP1 WB IHC-P IHC-F IF | 人成纤维细胞生长因子14(FGF14)活性蛋白GPC3重组人 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 蛋白 (His 标签) Protein |
| 肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体 Anti-Girdin WB IHC-P IHC-F IF | Claudin-11 peptide 少突胶质细胞跨膜蛋白抗原 0.5mgClaudin-11 peptide 少突胶质细胞跨膜蛋白抗原 |
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文献和实验-37. 14. Schulte, G., Bryja, V., Rawal, N., Castelo-Branco, G., Sousa, K. M., and Arenas, E. (2005) Purified Wnt-5a increases differentiationof midbrain dopaminergic cells anddishevelled phosphorylation. J Neurochem ,92 , 1550-1553. 15. Yue, Z
a. 未报道 b. 根据NCBI报道预测的全长蛋白分子量 与NusA标签融合且具有活性的蛋白 与这些切除NusA标签后保持活性且正确折叠的蛋白不同,还有很多报道指出目的蛋白在“NusA-目的蛋白”的融合形式时具有很好的活性。比如单链(ScFv)催化活性抗体14D9(Zheng 2003),来自Aequorea
细胞因子简介 细胞因子(Cytokine,CK)是一类能在细胞间传递信息、具有免疫调节和效应功能的天然活性蛋白质,可以有效促进免疫细胞(如DC细胞,CIK细胞等)、干细胞的体外生长。根据细胞因子主要的功能可分为以下几类: 1,白细胞介素(Interleukin,IL)由淋巴细胞、单核细胞或其它非单个核细胞产生的细胞因子,在细胞间相互作用、免疫调节、造血以及炎症过程中起重要调节作用。 2,集落刺激因子(Colonystimulatingfactor,CSF)根据不同细胞因子刺激造血
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