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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
59
- 英文名:
Active Interleukin 15 (IL15)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 人白介素15(IL15)活性蛋白 |
| 货号 | LZ-D7505 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Homo sapiens (Human,人) 。 |
英文别名:
物种:Homo sapiens (Human,人) 。
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:5.1
应用:Cell culture; Activity Assays
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 热休克蛋白90α/HSP90 α抗体 Anti-HSP90 alpha WB IHC-P IHC-F IF | TIMP1重组大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白 Protein |
| 转录因子HEY2蛋白抗体 Anti-HEY2 WB IHC-P IHC-F IF | GnRHR peptide 促性腺激素释放激素受体抗原 0.5mgGnRHR peptide 促性腺激素释放激素受体抗原 |
| 肺癌相关蛋白Y抗体 Anti-LAGY WB IHC-P IHC-F IF | CD19重组人 CD19 / Leu-12 蛋白 (His 标签) Protein |
| 心脏和神经嵴衍生蛋白1抗体 Anti-HAND1 WB IHC-P IHC-F IF | BPIFA2 Protein Human 重组人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 标签) |
| 己糖激酶2抗体 Anti-Hexokinase II WB IHC-P IHC-F IF | IFNGR2 Protein Mouse 重组小鼠 IFNGR2 蛋白 (His 标签) |
| 冠状动脉,仅供科研 | DIABLO重组人 SMAC / Diablo 蛋白 (His 标签) Protein |
| 颌舌肌,仅供科研 | PRDM2 Protein Human 重组人 PRDM2 / RIZ1 蛋白 (GST 标签) |
| 何杰金氏淋巴瘤组织芯片,仅供科研 | PRND重组人 PRND / Prion protein 2 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 海马,仅供科研 | IL13RA2 Protein Canine 重组狗 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (His 标签) |
| (APS),仅供科研 | GFRA3重组小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 蛋白 (His 标签) Protein |
| 整合素样金属蛋白酶与凝血酶4型抗体 Anti-ADAMTS4 WB IHC-P IHC-F IF | ASK1/MAPKKK5 细胞凋亡信号调节激酶1/原活化蛋白激酶激酶激酶5抗原 0.5mgASK1/MAPKKK5 细胞凋亡信号调节激酶1/原活化蛋白激酶激酶激酶5抗原 |
| 自噬相关蛋白9B抗体 Anti-ATG9B WB IHC-P IHC-F IF | CNTN3 Protein Rat 重组大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 标签) |
| 自噬相关蛋白13抗体 Anti-ATG13 WB IHC-P IHC-F IF | HAVCR1 Protein Human 重组人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白 (aa 1-135, His 标签) |
| 自噬相关蛋白12抗体 Anti-Apg12 WB IHC-P IHC-F IF | 人白介素15(IL15)活性蛋白CCL23重组人 CCL23 / MIP 3 蛋白 Protein |
| 自噬相关蛋白3抗体 Anti-ATG3 WB IHC-P IHC-F IF | 胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)重组蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2 (IGFBP2) |
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文献和实验; etc.). The resultingpurified product is useful in a variety of assays, including signalingstudies in established cell lines, explant manipulations, and in vivoexperiments (for examples, see refs. (3 , 5 – 15) ). 2. Materials 2.1. Production of Wnt3A CM 1. Cell line
。 ■ 蚯蚓血红蛋白(Karlsen 2005)——酶切后,用分子筛分离纯化蚯蚓血红蛋白,纯化后的蛋白通过圆二色谱检测得到的α-螺旋结构与模型预期结果一致,且纯化后的蛋白可以以单体的形式稳定保存。 ■ 人白介素-29(Li 2006)——用S-蛋白亲和层析比Ni2+亲和层析可以得到更纯的目的蛋白。将融合蛋白N端的NusA/His•Tag®/S•Tag™标签切掉后,用链亲和素琼脂去除生物素标记的凝血酶。用水疱性口膜炎病毒(VSV)处理固定的人羊膜上皮细胞(WISH 细胞)后,通过检测纯化
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