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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
32
- 英文名:
Eukaryotic Interleukin 10 (IL10)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
| 产品名称 | 兔白介素10(IL10)真核蛋白 |
| 货号 | LZ-D7310 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) 。 |
英文别名:CSIF; IL10A; TGIF; Cytokine Synthesis Inhibitory Factor
物种:Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) 。
来源:真核表达
宿主:293F cell
内毒素水平:<1.0EU per 1μg (determined by the LAL method)
亚细胞定位:分泌
预测分子量:20.0kDa
实际分子量:20kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Ser19~Ser178 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:8.3
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| FSTL3重组小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白 (His 标签) Protein | 大鼠端粒酶(TE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 |
| CSF2 Protein Human 重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 标签) | 人-氯化物依赖性牛磺酸转运体(SLC6A6/TA)免疫试剂盒 Human SLC6A6 ELISA Kit |
| IL36B重组人 IL36B / IL1F8 蛋白 Protein | Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISAKit小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T |
| IL13RA1 Protein Mouse 重组小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 标签) | 冰冻切片组织蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒-LEPTIN10/20次 |
| CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原 0.5mgCG6856-PA peptide CG6856-PA抗原 | Humanplasminogenactivator,PLGAELISA试剂盒人纤溶酶原激活剂(PLGA)ELISA试剂盒规格:96T/48T |
| IGJ Protein Human 重组人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白 (His 标签) | 人天青杀素(AZU)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 |
| DDR2重组人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (His 标签) Protein | 猪白介素3(IL-3)免疫试剂盒 Porcine ierleukin 3,IL-3 ELISA Kit |
| HA Protein H2N2 重组甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) | Humansecondarylymphoid-tissuechemokine,SLCELISAKit 人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 |
| 细胞外信号调节激酶2(ERK2)重组蛋白 Recombinant Extracellular Signal Regulated Kinase 2 (ERK2) | 大鼠孕受体(PROGR)ELISA试剂盒 ,英文名: PROGR ELISA Kit |
| S100B重组人 S100B 蛋白 (Fc 标签) Protein | ELISAKitMyosin大鼠肌球蛋白规格:48T/96T |
| SEMA4D Protein Rat 重组大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 蛋白 (His 标签) | ELISAKitOX-B猪食欲素/阿立新B规格:48T/96T |
| CHODL重组大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 (His 标签) Protein | Humanosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISA试剂盒人破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒规格:96T/48T |
| FCGR2A重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 标签) Protein | CLIAKitfoFPIHumaissuefactorpathwayinhibitorELISAKit人组织因子途径抑制物规格:48T/96T |
| GLI1(GLI-Kruppel family member 1 0.5mgGLI1(GLI-Kruppel family member 1) 下游转录因子Gli1蛋白抗原 | 兔白介素10(IL10)真核蛋白人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA检测试剂盒Humanai-endothelialcellaibody,AECAELISAKit 96T/48T |
| SULT1A3 Protein Human 重组人 SULT1A3 蛋白 (His 标签) | 大鼠白介素23(IL-23)免疫试剂盒 Rat Ierleukin 23,IL-23 ELISA Kit |
天然蛋白质关键参数有哪些?
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
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文献和实验相关专题 &NBS p; Interleukin 10 Interleukin-10 (IL-10 or IL10), also known as human cytokine synthesis inhibitory factor (CSIF), is an anti-inflammatory cytokine. In humans IL-10 is encoded
【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择!(接原原核表达研究者关心的10个问题贴)
Origami 2系列,thioredoxin reductase (trxB) 和glutathione reductase (gor)两条主要还原途径双突变菌株,显著提高细胞质中二硫键形成几率,促进蛋白可溶性及活性表达。(卡那霉素敏感) Rosetta-gamiTM2则是综合上述两类菌株的优点,既补充7种稀有密码子,又能够促进二硫键的形成,帮助表达需要借助二硫键形成正确折叠构象的真核蛋白。(卡那霉素敏感) Origami B是衍生自 lacZY突变的 BL21菌株,这个突变能根据IPTG的浓度精确
性的方式,来诱导IL10的产生(这是由于MCMV感染后,NK细胞被激活且生存和增殖能力加强)。这个发现引入注目,其研究的结果有更广泛的意义:因为这个研究结果对慢性病毒感染过程中的免疫调节,及相关的免疫病理和病毒清除有启示意义。文献已经报道,在其它慢性病毒如HCMV、HCV和HIV感染的过程中,表达激活受体的NK细胞所占比例的改变,可以上调IL-10水平。因此本研究的意义在于进一步证实了,NK细胞的早期激活有助于限制CD8T细胞引起的免疫病理及病毒的持续感染。 【PI主页】 http
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