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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
23
- 英文名:
Recombinant Interleukin 17D (IL17D)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 小鼠白介素17D(IL17D)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D7196 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
英文别名:Interleukin-27
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:分泌, 细胞外基质
预测分子量:23.8kDa
实际分子量:24kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Ala23~Arg205 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:9.3
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISAKit大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T | PFN4重组人 PFN4 / Profilin 4 蛋白 (His 标签) Protein |
| 大鼠肝脂酶(HL)ELISA试剂盒 ,英文名: HL ELISA Kit | TNF Protein Canine 重组狗 TNF-alpha / TNFA / TNFSF1A 蛋白 |
| Porcine ierleukin 4 (IL-4) ELISA Kit 猪白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 | 胶质细胞系来源神经营养因子受体α1(GFRα1)重组蛋白 Recombinant Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor Receptor Alpha 1 (GFRa1) |
| 创伤弧菌(VV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T | SELPLG重组小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 蛋白 Protein |
| CLIAKitforMDC/CCL22(HumanMacrophage-DerivedChemokine)ELISAkit人巨噬细胞来源的趋化因子规格:48T/96T | FAS Protein Human 重组人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 (His 标签) |
| Humanheat-labileeerotoxinBsubunit,LTBELISAKit人不耐热肠毒素B亚单位(LTB)ELISA试剂盒规格:96T/48T | IFNW1 Protein Human 重组人 Interferon omega-1 / IFNω / IFNW1 蛋白 (Fc 标签) |
| 人血管紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | ROCK2 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2 0.5mgROCK2 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2) Rho相关蛋白激酶2抗原 |
| 猪热休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)免疫试剂盒 Pig Heat shock 70 kDa protein 1A,HSPA1A ELISA kit | HA重组甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein |
| Humanplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit 人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | CHI3L2 Protein Human 重组人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白 (His 标签) |
| HumanMannose,MNELISA试剂盒人甘露糖(MN)ELISA试剂盒规格:96T/48T | A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human 0.5mgA/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽 |
| 全血总RNA化试剂盒20次 | DLL1重组人 DLL1 / Delta-1 蛋白 (His 标签) Protein |
| ELISAKitdsDNA人抗双链DNA抗体/天然DNA抗体规格:48T/96T | PRAC Protein Human 重组人 PRAC 蛋白 (His & SUMO 标签) |
| 人胞浆型0脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒HumancytosolicphospholipaseA2,cPLA2ELISAKit 96T/48T | CANT1重组人 CANT1 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 大鼠周脂素(Plin1/Peri/Plin)ELISA试剂盒 ,英文名: Plin1/Peri/Plin ELISA Kit | 小鼠白介素17D(IL17D)重组蛋白FGF21重组小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 (His 标签) Protein |
| 大鼠成纤维细胞生长因子8(FGF8)免疫试剂盒 Rat Fibroblast Growth Factor 8,FGF8 ELISA Kit | FGFR4 Protein Rat 重组大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (His 标签) |
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文献和实验Immunity:「填补教科书」董晨院士团队解析 IL-17D 重要功能,并首次发现其受体
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340/220基因的重组载体,转染CHO-A6细胞系和CHO dhfr-细胞系,经筛选获得可表达gp340/220蛋白的细胞株,经纯化的gp340/220免疫小鼠。2周后小鼠血清中检测到明显的gp340/220特异性抗体,表明CHO细胞表达的gp340/220具有同天然膜抗原相似的分子量、糖基化程度、免疫特异性和免疫原性,可望成为EB病毒基因工程亚单位疫苗。 国外有研究也将gp340/220基因克隆构建重组载体,但经过定点突变使之只合成gp340蛋白。该种蛋白同样能被抗gp340220的单克隆抗体所识别
有 ie-1、ie-2、lef类基因、p35、pe38等。2、杆状病毒载体表达系统的特点 AcNPV病毒用作外源基因的表达载体,通常是通过体内同源重组的方法,用外源基因替代多角体蛋白基因而构建重组病毒。由于多角体基因启动子在感染后18~24h开始转录和翻译,一直持续到70 h。外源基因置换掉多角体基因后,并不影响后代病毒的感染与复制,意味着重组病毒不需要辅助病毒的功能。 杆状病毒表达系统自从第一次用来表达干扰素以后在许多重组蛋白的表达中得到广泛应用,例如用于表达白介素(IL)一2,3、BMP及多种病毒蛋白等。相对
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