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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
59
- 英文名:
Recombinant Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 兔肿瘤坏死因子α(TNFa)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6769 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) |
英文别名:DIF; TNF-A; TNFSF2; Cachectin; Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily Member 2
物种:Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:Cell membrane; Secreted. Single-pass type II membrane prote
预测分子量:21.1kDa
实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Leu80~Leu235 (Accession # P04924) with
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:6.5
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| HumanProinsulin,PIELISAKit人胰岛素原(PI)ELISA试剂盒规格:96T/48T | CST3重组小鼠 Cystatin C / CST3 蛋白 (His 标签) Protein |
| 大鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒 ,英文名: AMA ELISA Kit | TLK2 Protein Human 重组人 TLK2 / PKU-ALPHA 蛋白 (aa 397-772, His & GST 标签) |
| 鸡17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA检测试剂盒Chicken17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit 96T/48T | TGFB1重组人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 Protein |
| 口蹄疫病毒Asia-1亞型(FMDV-A1)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T | CDH13 Protein Rat 重组大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 (His 标签) |
| CLIAKitforNO(Mouseniicoxide)ELISAKit小鼠规格:48T/96T | Caspase-8 (pro Mch5 0.5mgCaspase-8 (pro Mch5) 半胱氨酸蛋白酶8抗原 |
| Human cytochrome P450c21B/21- hydroxylase (CYP21B) ELISA Kit 人细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)ELISA试剂盒 | CPVL Protein Human 重组人 CPVL / Carboxypeptidase 蛋白 (His 标签) |
| Humanai-Bactericidalpermeabilityincreasingproteinaibody,BPI-AbELISAKit 人抗杀菌通透性蛋白抗体(BPI-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | B4GALT1重组人 B4GALT1 / GGTB2 蛋白 (His 标签) Protein |
| HumanCyclosporineA,CsAELISA试剂盒人环孢素A(CsA)ELISA试剂盒规格:96T/48T | IFNGR1 Protein Rat 重组大鼠 IFNGR / IFNGR1 蛋白 (Fc 标签) |
| 组织HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定性检测试剂盒20次 | CD40重组食蟹猴 / 恒河猴 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| Humanpokeweedmitogen,PWMELISAKit人美洲商陆素(PWM)ELISA试剂盒规格:96T/48T | IL3RA Protein Canine 重组狗 IL3RA 蛋白 (His 标签) |
| 人Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | PPIA重组小鼠 Cyclophilin A / PPIA / CYPA 蛋白 (His 标签) Protein |
| 山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒 Goat Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA KIT | Beta-catenin/ Beta-cats β-连环蛋白抗原(β-β链接素 0.5mgBeta-catenin/ Beta-cats β-连环蛋白抗原(β-β链接素) |
| RabbieceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA试剂盒兔核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒规格:96T/48T | TPT1 Protein Human 重组人 TPT1 / Tumor 蛋白 (His 标签) |
| 尿肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体死亡受体4(AIL-DR4)ELISA试剂盒 ,英文名: AIL-DR4 ELISA Kit | 兔肿瘤坏死因子α(TNFa)重组蛋白MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor 0.5mgMGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor) 层粘连蛋白受体1抗体 |
| HumanBcellreceptor,BCRELISA试剂盒人B细胞受体(BCR)ELISA试剂盒规格:96T/48T | SLAMF6重组人 SLAMF6 / Ly108 蛋白 (His 标签) Protein |
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文献和实验1975年Carswell等发现接种BCG的小鼠注射LPS后,血清中含有一种能杀伤某些肿瘤细胞或使体内肿瘤组织发生出血坏死的因子,称为肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)。1985年Shalaby把巨噬细胞产生的TNF命名为TNF-α,把T淋巴细胞产生的淋巴毒素(1ymphotoxin,LT)命名为TNF-β。TNF—α又称恶质素。 1.TNF的产生 (1)TNF-α是一种单核因子,主要由单核细胞和巨噬细胞产生,LPS是较强的刺激剂。IFN—r、M—CSF
干细胞或分化不同阶段的造血细胞在半固体培养基中形成不同的细胞集落,分别命名为G-CSF、M-CSF、GM-CSF、SCF、EPO等。不同CSF不仅可刺激不同发育阶段的造血干细胞和祖细胞增殖的分化,还可促进成熟细胞的功能。 3,干扰素(Interferon, IFN)是某些病毒感染的细胞产生一种物质,可干扰病毒的感染和复制。根据干扰素的来源和结构,可分为IFN-α、IFN-β和IFN-γ,分别由白细胞、成纤维细胞和活化T细胞所产生,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等作用。 4,肿瘤坏死因子
2和与抗原加工有关的基因称之为低分子量多肽或称大的多功能蛋白酶LMP2(low molecular weight polypeptides or large multifunctional protease-2)、LMP7也位于Ⅱ类基因区。Ⅲ类基因区包括补体C2、C4、B因子,此外,21羟化酶A与B、HSP70(heat shock protein70,热休克蛋白70)和肿瘤坏死因子α、β基因也在这里。21A是假基因,21B具有编码21羟化酶功能。21羟化酶是肾上腺皮质合成皮质醇和醛固醇必不可少的酶
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