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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
45
- 英文名:
Recombinant Interleukin 2 (IL2)
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20度
- 规格:
10µg50µg 200µg 1mg 5mg
IPTG浓度
有可能,宿主中的蛋白表达将通过lac操纵子系统操作。这个系统的详细解释可以在别处找到,你加入异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),一种乳糖类似物,控制蛋白的表达。蛋白的表达应处于生长的对数期,即当溶液的波长600(OD 600)处的光密度达到0.4-0.6。 如果你的目标是可溶性蛋白质,最好不要改变细胞中蛋白的折叠功能。已经假定不溶性蛋白可能是由于分子伴侣的存在。因此,使用高浓度的IPTG(> 1mM)可能不总是产生的结果。尝试几个不同的浓度,看看哪一个给你最高的可溶性蛋白的产量。
温度
偶尔,你可以在37°C的典型温度下,通过生长和诱导分离可溶性形式的蛋白质,但通常情况下,溶解度在较低温度下增强。可尝试在30°C,25°C和18°C下进行诱导。 注意:如果首先在37℃生长,先让培养物冷却到诱导温度,再加入IPTG。
诱导时间
更长并不总是更好。对于对宿主有毒的蛋白尤其如此。在诱导期间,每隔几个小时取样,并检查目的蛋白的表达。典型的诱导时间根据温度而变化:对于37℃,尝试4小时;对于30℃,进行5-6小时,并且任何低于25℃的温度应该允许生长过夜。
| 产品名称 | 犬白介素2(IL2)重组蛋白 |
| 货号 | LZ-D6510 |
| 规格 | 10µg50µg 200µg 1mg 5mg |
| 物种 | Canis familiaris; Canine (Dog,犬) |
英文别名:TCGF; Lymphokine; T-Cell Growth Factor; Aldesleukin
物种:Canis familiaris; Canine (Dog,犬)
来源:原核表达
宿主:E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位:分泌
预测分子量:21kDa
实际分子量:21kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Met1~Thr155 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:4.61
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10µg50µg 200µg 1mg 5mg
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重组蛋白表达体系分析:
(一)原核表达系统
原核表达系统有大肠杆菌表达系统、芽孢杆菌表达系统、链霉菌表达系统。其中最常用的表达系统主要是大肠杆菌表达系统。卡梅德生物通过每年多达400个原核蛋白制备项目的技术积累拥有一套完整的蛋白表达和纯化方案,为客户提供优质服务。
(二)酵母表达系统
酵母是一种真核微生物,其细胞有表达外源蛋白的能力,可以达到一个相当高的胞密度状态,在酵母中表达外源蛋白可以进行翻译后修饰,如磷酸化和糖基化。由于酵母宿主细胞结合了细菌和高阶生物宿主细胞表达系统的优良特性,当外源蛋白未能成功地在大肠杆菌中表达时,它是一个不错的选择。用于外源蛋白表达的酵母菌株包括酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母和乳酸克鲁维酵母。卡梅德生物拥有丰富的酵母蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制酵母表达策略。
(三)昆虫细胞表达系统
膜蛋白、大分子质量蛋白和蛋白激酶这些很难用细菌表达系统表达的蛋白,在Sf9或High-5等昆虫细胞中实现了表达。在大多数昆虫细胞表达系统中,外源基因通过杆状病毒载体转染宿主细胞,含有目标基因的标记盒通过同源重组并入宿主基因组中。卡梅德生物可以提供纯度高达95%的全长膜蛋白定制产品,免费对客户提供的基因进行序列分析,据Sf9,Sf21,Hi-5及S2昆虫细胞的密码子偏爱性,免费为您进行密码子优化,从而有效提高重组蛋白表达量。
(四)哺乳动物细胞表达系统
当含有复杂二硫键或翻译后修饰的靶蛋白不能使用其他表达系统表达时,哺乳动物细胞可表达外源蛋白。常用的外源蛋白表达的哺乳动物细胞系包括海拉(Hela)细胞、人胚肾细胞(HEK293)和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)。卡梅德生物建立了完善的哺乳表达体系,包括但不限于FreeStyle 293-F cell line和Expi CHO-S等细胞系,配合卡梅德设计的高表达载体(含有全长的CMV启动子以及优化后的分泌信号肽序列),能够为客户提供更高表达水平的重组蛋白哺乳动物细胞表达与制备。
| 人免疫球蛋白M(IgM)ELISA检测试剂盒HumanImmunoglobulinM,IgMELISAKit 96T/48T | TNFSF12重组大鼠 TNFSF12 蛋白 (Fc 标签) Protein |
| 鸭免疫球蛋白E(IgE)免疫试剂盒 Duck Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit | IGF1 Protein Human 重组人 IGF1 / IGF-I 蛋白 |
| CLIAKitforPACAPELISAKit小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽规格:48T/96T | GADD45A重组人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
| 水中肠球菌(Eerococci)荧光定量检测试剂盒20次 | GLO1 Protein Mouse 重组小鼠 GLO1 / Glyoxalase 1 蛋白 (His 标签) |
| ELISAKitCD4人白细胞分化抗原4规格:48T/96T | ELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原 0.5mgELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原 |
| 英文名称Mousethyroopin-releasinghormoneELISAKIT小鼠促甲状腺素释放激素(H)规格:96T/48T | RSV-G Protein Respiratory syncytial virus/RSV 重组人类呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 蛋白 (95% Homology) (His 标签) |
| 冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色试剂盒50次 | 盐皮质激素受体(MR)重组蛋白 Recombinant Mineralocorticoid Receptor (MR) |
| RatBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISA试剂盒大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒规格:96T/48T | TGFBI重组人 TGFBI / BIGH3 蛋白 (His 标签) Protein |
| 小鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ) ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | HA重组甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein |
| Rat plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒 | EPOR Protein Human 重组人 EPOR / Erythropoietin Receptor 蛋白 (Fc 标签) |
| 肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒 ,英文名: Kim-1 ELISA Kit | HA重组甲型流感 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein |
| PorcineGlucoseanspoer2,GL2ELISA试剂盒猪糖转运蛋白2(GL2)ELISA试剂盒规格:96T/48T | AGO2 Protein Human 重组人 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 蛋白 (His 标签) |
| Humanai-presynapticmembraneaibody,PsmAbELISAKit人抗突触前膜抗体(PsmAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T | SCG2 Protein Human 重组人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 标签) |
| HumanAcetylcholinesterase,AChEELISA试剂盒人乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 犬白介素2(IL2)重组蛋白PCX/PODXL(Podocalyxin 0.5mgPCX/PODXL(Podocalyxin) 足细胞特异蛋白抗原 |
| 人白介素2(IL-2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | CST2重组人 Cystatin SA / CST2 蛋白 (His 标签) Protein |
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文献和实验「铲屎官」注意了!剑桥大学揭示这些基因的改变或让猫猫狗狗成为
细胞 iBMDM 和犬的巨噬样细胞 DH82。结果表明小鼠巨噬细胞感染 2 小时后开始裂解,而犬的巨噬样细胞经过 12 小时仍存活,表明犬的细胞对于鼠伤寒沙门菌的耐受性更高。接着,研究者在小鼠模型上通过 CRISPR-Cas9 技术构建了与 caspase-1/-4 融合蛋白催化作用相当的重组蛋白。小鼠细胞在脂多糖(LPS)刺激下很快裂解,而犬的巨噬样细胞对于 LPS 的刺激则无反应。进一步的体外实验表明,caspase-1/-4 融合蛋白能激活 IL-1β 并且同时切割消皮素 D。图片来源:Cell
1、CHO细胞 CHO细胞即中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary),该细胞具有不死性,可以传代百代以上,是目前生物工程上广泛使用的细胞。全世界批准正式应用于人类疾病治疗或疾病预防的基因工程产品约有三十多种,其中只有一种(乙肝疫苗)是由酵母菌生产的,其余所有产品都是由CHO细胞和大肠杆菌生产的,大肠杆菌不能形成有活性的二聚体(如白介素2),也不具有糖基化的功能(如EPO),而CHO却具有如上的功能,因此CHO成为表达复杂生物大分子的理想宿主。另外CH0细胞在基因工程使用中
化镁);0.1mg/mL~1mg/mL的肝微粒体蛋白;合适浓度的待测物,一般推荐为1μM,于37°C水浴孵育,每个样品平行3次,以不包含NADPH发生系统的样品作为阴性对照。于预设的反应时间点,如0,5,10,15,30,60 min后加入等体积预冷的乙腈终止反应。 3.3 原型药物或代谢产物的检测 采用HPLC、HPLC-MC和HPLC-MC/MC测定温孵液中原型药物和其代谢产物。图5为采用LC-MS/MS测定药物在人、犬和大鼠肝微粒体中的代谢情况,从图上可知,药物在三种肝微粒体中均存在明显代谢,但不同
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