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信帆生物
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文献和实验一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
请问怎样配制:缓冲盐:50mmol/L硼砂(pH=9.7)并含有18%的甲醇? 称取硼砂(Na2B4O7·10H2O)19.07g(注意不能烘干),置于1000ml溶量瓶中,溶于无二氧化碳的水中,加甲醇227ml甲醇,用无二氧化碳的水稀释至刻度,即得(pH值可用硼酸或氢氧化钠进行调整)。存放时,应防止空气中的二氧化碳进入。 补充:一般18%指得是100ml的溶液中含有18g的甲醇。我们在实验中凡是遇到百分比的浓度时都是这样处理的。 具体计算如下:甲醇密度:0.792,那么按照上面的概念
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
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