人脑源性神经营养因子(BDNF)多克隆抗体(生物素标记)

公司产品仅供科研研究实验
产品名称：人脑源性神经营养因子(BDNF)多克隆抗体(生物素标记)
英文名称：Biotin-Linked Polyclonal Antibody to Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF)
别名：Neurotrophin; Abrineurin
细胞因子 感染免疫　神经科学
物种　Homo sapiens (Human，人) 相同的名称，不同的物种。

货号	规格	产品名称
LZ-KH1577	20µl 100µl 200µl 1ml 10ml	人脑源性神经营养因子(BDNF)多克隆抗体(生物素标记)

来源　抗体标记
Ig类型　IgG
纯化方式　抗原特异性亲和纯化
标记物 生物标记
原抗体-脑源性神经营养因子(BDNF)多克隆抗体
缓冲液成份　0.01M 磷酸盐缓冲液（pH7.4，containing 0.05% Proclin-300，50% glycerol）
性状　液体
浓度　500μg/mL
且适物种　Mus musculus (Mouse，小鼠), Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
应用　WB; IHC; ICC.
如果抗体需用于流式细胞术，请参见流式抗体。
特异性
该抗体是针对BDNF的兔多克隆抗体。在免疫组织化学染色和免疫印迹实验中能识别BDNF。
用法
Western blotting: 0.5-2ug/ml
Immunocytochemistry in formalin fixed cells: 5-20ug/ml
Immunohistochemistry in formalin fixed frozen section: 5-20ug/ml
Immunohistochemistry in paraffin section: 5-20ug/ml
Enzyme-linked Immunosorbent Assay: 0.05-2ug/ml
Optimal working dilutions must be determined by end user.
储存
经常使用则4°C保存。-20°C保存不超过两年。避免反复冻融。
规格:20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
制备单克隆抗体具体步骤：
一、免疫动物选择：
根据需要产生目标抗原的免疫反应，选择合适的免疫动物。例如，小鼠是最常用的免疫动物之一，因其易于操作且在免疫应答方面较为强大。
二、抗原免疫
将目标抗原注射到免疫动物体内，通常需要多次免疫以激发免疫反应。可以选择不同的免疫路线，如皮下、腹腔、静脉等。
三、细胞融合
从免疫动物获得脾细胞或淋巴细胞，与骨髓瘤细胞或其他癌细胞（如SP2/0、NS0等）融合，形成杂交瘤细胞。融合细胞通常使用聚乙烯醇（PEG）或电穿孔等方法促进细胞融合。
四、 杂交瘤细胞筛选
对融合细胞进行筛选，一般使用HAT选择性培养基，通过对非杂交瘤细胞和单克隆杂交瘤细胞的抗代选择，筛选出产生目标抗体的单克隆杂交瘤细胞。
五、单克隆抗体生产
从筛选出的单克隆杂交瘤细胞中获取单一细胞系，并进行大规模培养和产生抗体。一般可采用体外或体内方式生产单克隆抗体。
六、 抗体纯化
通过不同的方法对产生的单克隆抗体进行纯化，去除杂质，例如使用蛋白A/G层析、蛋白L层析、蛋白G层析等。
七、鉴定和验证
对纯化后的单克隆抗体进行鉴定和验证，例如使用酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫印迹（Western blotting）等方法，确定其免疫特异性和活性。
八、 应用
将制备好的单克隆抗体应用于具体的研究、诊断或治疗等领域，例如免疫组化、流式细胞术、免疫疫治疗等。




抗体分子标记技术：
（一）原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
（二）准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；
2.仪器
凝胶过滤柱；￥-记数器；玻璃纤维滤。
（三）操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；
2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
什么是多克隆抗体，单克隆抗体？
单克隆抗体：抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇，也称为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇，因此，机体也可以产生多种不同的抗体。由单一 B 细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体。5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
多克隆抗体：由多个 B 淋巴细胞克隆产生的，受到多种抗原决定簇刺激 并可以与多种抗原表位结合的抗体。从某种角度而言，多克隆抗体是多种单抗的混合物。
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