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- 规格:
5ml
入 4℃冰箱里的冰上过夜解冻,冻融后,轻轻摇晃试剂
瓶使基质胶分散均匀。
2. 请始终保持在冰上操作基质胶,所有操作均需在无菌
环境下进行,试剂瓶瓶盖可用 70%乙醇喷洒擦拭,并自
然干燥。
3. 成胶后MeisenCTCC®EHS基质胶放置于 4℃的冰上
24-48 小时后可重新呈液态。
4. 细胞可在 0.5 mm 厚度MeisenCTCC®EHS基质层表面
生长,也可在 1 mm 厚度的MeisenCTCC®EHS基质胶内
生长。
5.稀释的MeisenCTCC®EHS基质胶会形成非胶质的蛋白
层,可以用于细胞贴壁,但不能用于细胞的分化研究。
注意事项:
1.建议您第一次融化后按照单次用量进行分装,-20℃
以下保存,避免反复冻融。
2.MeisenCTCC®EHS基质胶在温度高于10℃时就会开
始凝固成胶,请始终保持在冰上操作基质胶,所有接
触基质胶的培养器皿或培养基都必须预冷后使用。
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文献和实验人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
LBO的形态学。 下图显示了具有折叠结构(箭头)的最佳类器官,可以选择这些类器官在使用 3dGRO™ 肺类器官成熟培养基(步骤 4)的 ECM基质胶包埋夹层培养中进一步成熟。 第 4 步:将肺芽类器官 (LBO) 分化为成熟的肺类器官(第 25-60 天) 1. 在冰上解冻降低生长因子浓度的ECM 基质胶 (E6909)。 2. 使用无菌镊子将无菌 24 孔细胞培养小室放到未经组织培养处理的 24 孔板中,每孔使用一个培养小室。 3. 将 50 µL 冷的含100% 减生长因子ECM基质胶分装
在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
)中。 4 °C过夜或在冰上解冻足量的减生长因子的ECM基质胶(E6909)。 在结肠上皮细胞分化的第 12 天,从培养箱中取出细胞并将漂浮在培养基中的球状体收集到 15 mL 锥形管中。 用 3 mL 1X PBS 清洗每个孔。 用 1 mL Accumax (A7089) 解离含有球状体(非悬浮球状体)的单层细胞,并37 °C孵育 5-10 分钟。 解离单层后,用 P-1000 移液器轻轻移取细胞 4-5 次,然后将 1 mL 细胞悬液转移到上述步骤 9 中制备的锥形管中。 4 °
时间不宜超过 2min。 25、将细胞悬液转移至 15ml 离心管中,加入 10ml 预冷的 DMEM/F12 培养基(含 10% FBS)。4℃ 条件下 220g 离心 5min,取细胞沉淀。 26、将所得细胞重复 8-12 步骤,完成 OC 类器官复苏。 图 2. OC 类器官的不同形态表型。即致密(左),囊性(中)和低内聚(右)型 OC 类器官。比例尺 200 μm【4】。 卵巢癌类器官样本来源不局限于活检样本或手术样本,腹水和胸腔积液中的癌细胞也同样可以用于构建 OC 类器官。培养
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