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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
31
- 克隆性:
单克隆
- 抗原来源:
单抗制备
- 抗体英文名:
Monoclonal Antibody to Interferon Alpha 2 (IFNa2)
- 抗体名:
人干扰素α2(IFNa2)单克隆抗体
- 标记物:
无标记物
- 宿主:
小鼠
- 适应物种:
Homo sapiens (Human,人)
- 免疫原:
干扰素α2(IFNa2)重组蛋白
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
科研实验
- 保存条件:
Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
- 浓度:
1mg/mL
- 规格:
20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 人干扰素α2(IFNa2)单克隆抗体 | 20µl 100µl 200µl 1ml 10ml | LZ-KH0947 |
英文名称:Monoclonal Antibody to Interferon Alpha 2 (IFNa2)
别名:IFNA2A; IFNA2B; IFNA2C; LeIF A; Alpha-2a Interferon; Interferon Alpha 2b; Interferon Alpha A
细胞因子
物种 Homo sapiens (Human,人) 相同的名称,不同的物种。
来源 单抗制备
宿主 小鼠
效价(克隆号)D4
Ig亚型 IgG2b Kappa
纯化方式 蛋白A + 蛋白G亲和纯化
标记物 无标记物
免疫原-干扰素α2(IFNa2)重组蛋白
缓冲液成份 0.01M 磷酸盐缓冲液(pH7.4,containing 0.05% Proclin-300,50% glycerol)
性状 液体
浓度 1mg/ml
且适物种 Sus scrofa; Porcine (Pig,猪)
应用 WB
如果抗体需用于流式细胞术,请参见流式抗体
特异性
该抗体是针对IFNa2的小鼠单克隆抗体。在免疫组织化学染色和免疫印迹实验中能识别IFNa2。
用法
Western blottin:g: 0.01-2μg/mL;
Optimal working dilutions must be determined by end user.
储存
经常使用则4°C保存。-20°C保存不超过两年。避免反复冻融
规格:20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
公司正在出售的产品:
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| CLIAKitforsCD30L(MouseSolubleClusterofdiffereiation30ligand)ELISAKit小鼠可溶性CD30配体规格:48T/96T | Anti-AQP4/FITC 荧光素标记水通道蛋白-4蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
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| CLIAKitforPAI-1ELISAKit大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1规格:48T/96T | 人干扰素α2(IFNa2)单克隆抗体Anti-IFN- Gamma/FITC(Interferon Gamma) 荧光素标记抗大、小鼠IFN-γ抗IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISA试剂盒人新生儿促甲状腺素(N-TSH)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-Plexin A2 神经丛蛋白A2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| RabbitVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISA试剂盒兔血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-KLK14 激肽释放酶14抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
单克隆抗体:抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。由单一 B 细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体。5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
多克隆抗体:由多个 B 淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激 并可以与多种抗原表位结合的抗体。从某种角度而言,多克隆抗体是多种单抗的混合物。
制备单克隆抗体具体步骤:
一、免疫动物选择:
根据需要产生目标抗原的免疫反应,选择合适的免疫动物。例如,小鼠是最常用的免疫动物之一,因其易于操作且在免疫应答方面较为强大。
二、抗原免疫
将目标抗原注射到免疫动物体内,通常需要多次免疫以激发免疫反应。可以选择不同的免疫路线,如皮下、腹腔、静脉等。
三、细胞融合
从免疫动物获得脾细胞或淋巴细胞,与骨髓瘤细胞或其他癌细胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成杂交瘤细胞。融合细胞通常使用聚乙烯醇(PEG)或电穿孔等方法促进细胞融合。
四、 杂交瘤细胞筛选
对融合细胞进行筛选,一般使用HAT选择性培养基,通过对非杂交瘤细胞和单克隆杂交瘤细胞的抗代选择,筛选出产生目标抗体的单克隆杂交瘤细胞。
五、单克隆抗体生产
从筛选出的单克隆杂交瘤细胞中获取单一细胞系,并进行大规模培养和产生抗体。一般可采用体外或体内方式生产单克隆抗体。
六、 抗体纯化
通过不同的方法对产生的单克隆抗体进行纯化,去除杂质,例如使用蛋白A/G层析、蛋白L层析、蛋白G层析等。
七、鉴定和验证
对纯化后的单克隆抗体进行鉴定和验证,例如使用酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹(Western blotting)等方法,确定其免疫特异性和活性。
八、 应用
将制备好的单克隆抗体应用于具体的研究、诊断或治疗等领域,例如免疫组化、流式细胞术、免疫疫治疗等。
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文献和实验重组人α2a/α2b干扰素(rHuIFN-α2a、rHuIFN-α2b)生产流程中不可缺少的一环是产品的质量监控,通常采用的是HEp-2/VSV或Wish/VSV系统检测干扰素的生物活性。此系统常由于VSV或细胞的影响而不够稳定,且检测周期较长。我们用自制的2种针对rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b的单克隆抗体(McAb)建立了定量检测rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b的双McAb夹心ELISA,敏感性达60pg/ml,结果与生物学活性检测相对应。试用于rHuIFN-α2a生产
夹心法ELISA检测人α2a,α2b干扰素(α2a,α2b)
重组人α2a/α2b干扰素(rHuIFN-α2a、rHuIFN-α2b)生产流程中不可缺少的一环是产品的质量监控,通常采用的是HEp-2/VSV或Wish/VSV系统检测干扰素的生物活性。此系统常由于VSV或细胞的影响而不够稳定,且检测周期较长。我们用自制的2种针对rHuIFN-α2a和rHuIFN-α2b的单克隆抗体(McAb)建立了定量检测rHuIFN-&alpha
单克隆抗体(McAb)亲和层析柱纯化重组人α2a干扰素(rHuIFN-α2a)
重组人α干扰素作为一种具有广谱抗病毒、抑制肿瘤细胞生长及免疫调节作用的 细胞因子 新型药物,已在国内外广泛投入临床应用,并取得了显著的疗效。国际上对用于临床的重组干扰素的纯度要求很高,美国NIH规定必须在90%以上,因此生产者普遍采用亲和层析纯化法。我们研制了rHuIFN-α2a的McAb 3F1,与CNBr活化的Sepharose 4B交联制成亲和层析柱,经1年60余次较大规模试用表明具有较理想的亲和层析纯化rHuIFN-α2a的性能,达到
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