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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
59
- 克隆性:
单克隆
- 抗原来源:
单抗制备
- 抗体英文名:
Monoclonal Antibody to Interleukin 10 (IL10)
- 抗体名:
人白介素10(IL10)单克隆抗体
- 标记物:
无标记物
- 宿主:
小鼠
- 适应物种:
Homo sapiens (Human,人)
- 免疫原:
白介素10(IL10)重组蛋白
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
科研实验
- 保存条件:
Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
- 浓度:
1mg/mL
- 规格:
20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
单克隆抗体:抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。由单一 B 细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体。5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
多克隆抗体:由多个 B 淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激 并可以与多种抗原表位结合的抗体。从某种角度而言,多克隆抗体是多种单抗的混合物。
公司产品仅供科研研究实验
产品名称:人白介素10(IL10)单克隆抗体
英文名称:Monoclonal Antibody to Interleukin 10 (IL10)
别名:CSIF; IL10A; TGIF; Cytokine Synthesis Inhibitory Factor
细胞因子 感染免疫
物种 Homo sapiens (Human,人) 相同的名称,不同的物种。
| 货号 | 规格 | 产品名称 |
| LZ-KH0895 | 20µl 100µl 200µl 1ml 10ml | 人白介素10(IL10)单克隆抗体 |
宿主 小鼠
效价(克隆号)C8
Ig亚型 IgG2a Kappa
纯化方式 蛋白A + 蛋白G亲和纯化
标记物 无标记物
免疫原-白介素10(IL10)重组蛋白
缓冲液成份 0.01M 磷酸盐缓冲液(pH7.4,containing 0.05% Proclin-300,50% glycerol)
性状 液体
浓度 1mg/ml
且适物种 -
应用 WB; IHC; ICC; IP.
如果抗体需用于流式细胞术,请参见流式抗体。
特异性
该抗体是针对IL10的小鼠单克隆抗体。在免疫组织化学染色和免疫印迹实验中能识别IL10。
用法
Western blotting: 0.5-2μg/mL;
Immunohistochemistry: 5-20μg/mL;
Immunocytochemistry: 5-20μg/mL;
Optimal working dilutions must be determined by end user.
储存
经常使用则4°C保存。-20°C保存不超过两年。避免反复冻融。
规格:20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
制备单克隆抗体具体步骤:
一、免疫动物选择:
根据需要产生目标抗原的免疫反应,选择合适的免疫动物。例如,小鼠是最常用的免疫动物之一,因其易于操作且在免疫应答方面较为强大。
二、抗原免疫
将目标抗原注射到免疫动物体内,通常需要多次免疫以激发免疫反应。可以选择不同的免疫路线,如皮下、腹腔、静脉等。
三、细胞融合
从免疫动物获得脾细胞或淋巴细胞,与骨髓瘤细胞或其他癌细胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成杂交瘤细胞。融合细胞通常使用聚乙烯醇(PEG)或电穿孔等方法促进细胞融合。
四、 杂交瘤细胞筛选
对融合细胞进行筛选,一般使用HAT选择性培养基,通过对非杂交瘤细胞和单克隆杂交瘤细胞的抗代选择,筛选出产生目标抗体的单克隆杂交瘤细胞。
五、单克隆抗体生产
从筛选出的单克隆杂交瘤细胞中获取单一细胞系,并进行大规模培养和产生抗体。一般可采用体外或体内方式生产单克隆抗体。
六、 抗体纯化
通过不同的方法对产生的单克隆抗体进行纯化,去除杂质,例如使用蛋白A/G层析、蛋白L层析、蛋白G层析等。
七、鉴定和验证
对纯化后的单克隆抗体进行鉴定和验证,例如使用酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹(Western blotting)等方法,确定其免疫特异性和活性。
八、 应用
将制备好的单克隆抗体应用于具体的研究、诊断或治疗等领域,例如免疫组化、流式细胞术、免疫疫治疗等。
公司正在出售的产品:
| Human alpha 2 macroglobulin (alpha 2-MG) ELISA Kit 人α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA试剂盒 | Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgM 兔抗大鼠IgM 规格 1mg |
| 豚鼠雌激素(esogen)免疫试剂盒 Guinea pig esogen Elisa kit | Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Ser1480) 0酸化谷氨酸受体2B抗体 规格 0.1ml |
| 人垂草扁桃酸(VMA)ELISA检测试剂盒Humanvanillylmandelicacid,VMAELISAKit 96T/48T | Rhesus antibody Rh γ-taxilin/LSR5 脂多糖相关反应蛋白5抗体 规格 0.2ml |
| Rat aldehyde dehydrogenase (ALDH) ELISA Kit 大鼠乙脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒 | phospho-CDKN1B (Ser178) 英文名称: 0酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂抗体 0.1ml |
| 人去甲(NA)免疫试剂盒 human Noradrenaline,NA ELISA Kit | Rhesus antibody Rh TRIM3/RNF22 环指蛋白22抗体 规格 0.2ml |
| 小鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)免疫试剂盒 Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit | CHD1L 英文名称: 染色质解旋酶DNA结合蛋白抗体 0.1ml |
| Mouse ai thyroglobulin aibody (ATGA/TGAB) ELISA Kit 小鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒 | APOL5 英文名称: 载脂蛋白L5抗体 0.2ml |
| Rat macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit 大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒 | CK5+6 英文名称: 细胞角蛋白5+6抗体 0.1ml |
| 人凝血因子Ⅱ(FⅡ)免疫试剂盒 Human FⅡ ELISA Kit | Rhesus antibody Rh S100A11 S100钙结合蛋白A11抗体 规格 0.1ml |
| 小鼠芳香酶免疫试剂盒 Mouse Aromatase,ARO ELISA Kit | phospho-Cyclin D3 (Thr283) 英文名称: 0酸化周期素D3抗体 0.1ml |
| 人皮肤反应因子/炎性因子(SRF/IF)ELISA检测试剂盒Humanskieactivefactor/inflammatoryfactor,SRF/IFELISAKit 96T/48T | ABCD4 英文名称: 三0酸腺苷结合盒转运蛋白4抗体 0.2ml |
| Human gasic cancer marker CA199 人胃肠癌标志物CA199 | C22orf45 英文名称: 22号染色体开放阅读框45抗体 0.2ml |
| Monkey ierleukin 1 (IL-1) ELISA Kit白介素1(IL-1)ELISA试剂盒 | 人白介素10(IL10)单克隆抗体Rhesus antibody Rh STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原抗体 规格 0.2ml |
| 猪核因子-κB(NF-κB)免疫试剂盒 Pig Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit | C3orf19 英文名称: 3号染色体开放阅读框19抗体 0.2ml |
| 山羊免疫球蛋白G(IgG)免疫试剂盒 Goat Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit | C3orf49 英文名称: 3号染色体开放阅读框49抗体 0.2ml |
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文献和实验细胞7~10天后可产生腹水,密切观察动物的健康状况与腹水征象,待腹水尽可能多,而小鼠频于死亡之前,处死小鼠,用滴管将腹水吸入试管中,一般一只小鼠可获5~10ml腹水。也可用注射器抽提腹水,可反复收集数次。腹水中单克隆抗体含量可达到5~10mg/ml,这是目前最常用的方法,还可将腹水中细胞冻存起来,复苏后转种小鼠腹腔则产生腹水块、量多。 (七)单克隆抗体的鉴定 对制备的McAb进行系统的鉴定是十分必要的,应做下述几个方面的鉴定: 1.抗体特异性的鉴定 除用免疫原(抗原)进行
1. 杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。2. 单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
非常有效的。 图:单克隆抗体用生物素(A)或 Twin-Strep-tag®(B)标记,两种都可以固定在 Strep-Tactin®TACS 琼脂糖层析柱中。 总而言之,作为灵活的细胞研究工具,Strep-Tactin®TACS 琼脂糖层析柱在细胞分选的应用不仅限于阳选,还可以在阴选中结合多种生物素化抗体(或Twin-Strep-tag®标记的抗体)一起使用。整个细胞分选过程只需 10 分钟,是一种快速有效的细胞阴选方案。 实验中用到的产品列表 Strep-Tactin
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