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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
46
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
多抗制备
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA)
- 抗体名:
大鼠血管内皮生长因子A(VEGFA)多克隆抗体
- 标记物:
无标记物
- 宿主:
兔
- 适应物种:
Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
- 免疫原:
血管内皮生长因子A(VEGFA)重组蛋白
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
科研实验
- 保存条件:
Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
- 浓度:
500μg/mL
- 规格:
20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
单克隆抗体:抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。由单一 B 细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体。5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
多克隆抗体:由多个 B 淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激 并可以与多种抗原表位结合的抗体。从某种角度而言,多克隆抗体是多种单抗的混合物。
公司产品仅供科研研究实验
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠血管内皮生长因子A(VEGFA)多克隆抗体 | 20µl 100µl 200µl 1ml 10ml | LZ-KR0034 |
英文名称:Polyclonal Antibody to Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA)
别名:VEGF; VEGF-A; VPF; Vascular Endothelial Cell Growth Factor A; Vascular Permeability Factor
细胞因子 细胞凋亡 肿瘤免疫
物种 Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 相同的名称,不同的物种。
来源 多抗制备
宿主 兔
效价 -
Ig类型 IgG
纯化方式 抗原特异性亲和纯化
标记物 无标记物
免疫原-血管内皮生长因子A(VEGFA)重组蛋白
缓冲液成份 0.01M 磷酸盐缓冲液(pH7.4,containing 0.05% Proclin-300,50% glycerol)
性状 液体
浓度 0.5mg/ml
且适物种 -
应用 WB; IHC; ICC; IP.
如果抗体需用于流式细胞术,请参见流式抗体
特异性
该抗体是针对VEGFA的兔多克隆抗体。在免疫组织化学染色和免疫印迹实验中能识别VEGFA。
用法
Western blotting: 0.01-2μg/mL;
Immunohistochemistry: 5-20μg/mL;
Immunocytochemistry: 5-20μg/mL;
Optimal working dilutions must be determined by end user.
储存
经常使用则4°C保存。-20°C保存不超过两年。避免反复冻融。
规格:20µl 100µl 200µl 1ml 10ml
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
制备单克隆抗体具体步骤:
一、免疫动物选择:
根据需要产生目标抗原的免疫反应,选择合适的免疫动物。例如,小鼠是最常用的免疫动物之一,因其易于操作且在免疫应答方面较为强大。
二、抗原免疫
将目标抗原注射到免疫动物体内,通常需要多次免疫以激发免疫反应。可以选择不同的免疫路线,如皮下、腹腔、静脉等。
三、细胞融合
从免疫动物获得脾细胞或淋巴细胞,与骨髓瘤细胞或其他癌细胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成杂交瘤细胞。融合细胞通常使用聚乙烯醇(PEG)或电穿孔等方法促进细胞融合。
四、 杂交瘤细胞筛选
对融合细胞进行筛选,一般使用HAT选择性培养基,通过对非杂交瘤细胞和单克隆杂交瘤细胞的抗代选择,筛选出产生目标抗体的单克隆杂交瘤细胞。
五、单克隆抗体生产
从筛选出的单克隆杂交瘤细胞中获取单一细胞系,并进行大规模培养和产生抗体。一般可采用体外或体内方式生产单克隆抗体。
六、 抗体纯化
通过不同的方法对产生的单克隆抗体进行纯化,去除杂质,例如使用蛋白A/G层析、蛋白L层析、蛋白G层析等。
七、鉴定和验证
对纯化后的单克隆抗体进行鉴定和验证,例如使用酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹(Western blotting)等方法,确定其免疫特异性和活性。
八、 应用
将制备好的单克隆抗体应用于具体的研究、诊断或治疗等领域,例如免疫组化、流式细胞术、免疫疫治疗等。
公司正在出售的产品:
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| 豚鼠乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)免疫试剂盒 Guinea pig ai-hepatitis B virus surface aibody,HBsAb ELISA kit | phospho-Alpha synuclein(Ser129) 英文名称: 0酸化核突触蛋白α抗体 0.1ml |
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| Human platelet derived growth factor (PGF) ELISA Kit 人血小板生长因子(PGF)ELISA试剂盒 | PS(Human phosphatidylserine) ELISA Kit 人0脂酰丝酸 96T |
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| Rat immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 | Human membrane cofactor protein,MCP ELISA Kit 人膜辅蛋白 96T |
| Rat L phenylalanine ammonia lyase (PAL) ELISA Kit 大鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒 | c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原) 0.5mg |
| 小鼠骨成型蛋白15(BMP-15)免疫试剂盒 Mouse Bone Morphogenetic Protein 15,BMP-15 Elisa kit | TLR-9/CD289 ELISA kit 大鼠Toll样受体9 96T |
| 人细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体(IgG)免疫试剂盒 Human cytotoxin-associated protein(CagA)aibody(IgG)ELISA kit | Anti-Ins 胰岛素抗体(间接法二步法) 96T |
| Rat myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 大鼠髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 | Human Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 人血小板因子4 96T |
| Monkey ai liver cell membrane aibody (LMA) ELISA Kit 猴抗肝细胞膜抗体(LMA)ELISA试剂盒 | 大鼠血管内皮生长因子A(VEGFA)多克隆抗体Thioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原) 0.5mg |
| Human esogen / progesterone (PROG) ELISA Kit 人孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 | ANGA(Human anti-neutrophil granules antibody) ELISA Kit 人抗中性粒细胞颗粒抗体 96T |
| 兔干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫试剂盒 Rabbit C-X-C motif chemokine 10,CXCL10 ELISA kit | CCK-8(Human cholecystokinin octapeptide) ELISA Kit 人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽 96T |
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文献和实验9.12 Cell Res:VEGFA 信号通路在血管稳态调控过程中的两面性
① Cell Res:VEGFA 信号通路在血管稳态调控过程中的两面性内皮细胞响应信号刺激对血管形态、稳态和功能的调控至关重要。血管内皮生长因子 A (VEGFA) 自 20 世纪 80 年代被鉴定以来,其主要功能之一便是促进血管生长。中国科学院上海营养与健康研究所潘巍峻研究组在斑马鱼中发现,在 VEGFA 刺激条件下,cds2 基因突变胚胎的血管能够发生血管退化。斑马鱼活体成像技术表明,cds2 突变体的内皮细胞受 VEGFA 刺激能够通过逆向迁移和细胞凋亡来诱导血管退化。小鼠
一、多克隆抗体的概念抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样
这首先要从抗体的产生来探讨。把某一抗原免疫某种动物而得到单抗或多抗。如果用经免疫过的动物的脾细胞获得杂交瘤细胞,则得到单克隆抗体,如果用动物的血清,则得到多克隆抗体。但从理论上说,这些抗体都应针对抗原来自的动物,例如如果用 人蛋白 抗原免疫小鼠,则这些 抗体 为鼠抗人。 由于一个大蛋白分子表面具有多种抗原决定簇,因此,免疫动物后,这些不同的决定簇分别诱导动物产生不同的 抗体
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