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20mg
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文献和实验。这里介绍经典的盐桥法(又称为毛细管法)。(一)试剂准备1.变性液:0.5 M NaOH;1.5 M NaCl。2.中和液:1 M Tris-HCl(pH7.4);1.5 M NaCl;3.转移液(20× SSC): NaCl 175.3 g;柠檬酸三钠 82.2 g,NaOH 调 pH 至 7.0,加 ddH2O 至 1000 mL。(二)操作步骤1. 碱变性: 室温下将凝胶浸入数倍体积的变性液中 30 min。2. 中和: 将凝胶转移到中和液 15 min。3. 转移 按凝胶的大小剪裁 NC
。 4×样品缓冲液:1.5MTris-HCl(pH 6.8)166 ul,20% SDS 400 ul,400 ul 甘油,0.062g二硫苏糖醇,0.005 g溴酚蓝,定容至1 ml,-20℃备用。 1×磷酸盐缓冲液(PBS):8 g NaCl,0.2 g KCl,1.44 g Na2HPO4,0.24 g KH2PO4,加800 ml三蒸水,振 荡混匀后,用饱和盐酸调pH至7.8,定容至1000 ml。 10%过硫酸胺:0.2g溶于2ml三蒸水中,隔一周配一次,避光4℃放置
蛋白质印迹流程点击下载:蛋白质印迹实验方案溶液和试剂●裂解缓冲液这些缓冲液可在 4 ℃ 下保存数周,或者以分装形式在 -20 ℃ 下保存长达 1 年。Nonidet-P40 (NP40) 缓冲液150 mM NaCl1.0% NP40(可用 0.1% Triton X-100 替代)50 mM Tris-HCl pH 8.0蛋白酶抑制剂RIPA 缓冲液(放射免疫沉淀试验缓冲液)150 mM NaCl1.0% NP-40 或 0.1% Triton X-1000.5% 脱氧胆酸钠0.1% SDS
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