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Organotial小鼠正常卵巢类器官培养试剂盒

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  • ¥5500
  • 爱必信(absin)
  • abs9754
  • 上海
  • 2026年03月23日
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  • 企业认证

    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 品系

      -

    • 细胞类型

      -

    • 肿瘤类型

      -

    • 供应商

      爱必信(上海)生物科技有限公司

    • 库存

      现货

    • 生长状态

      -

    • 年限

      4°C保存,有效期3个月;-20°C保存,有效期1年,详见标签

    • 运输方式

      4°C保存,有效期3个月;-20°C保存,有效期1年,详见标签

    • 器官来源

      -

    • 是否是肿瘤细胞

      -

    • 细胞形态

      -

    • 免疫类型

      -

    • 物种来源

      -

    • 相关疾病

      -

    • 组织来源

      -

    • 英文名

      Mouse ovary Organoid Culture Kit

    • 规格

      1kit

    产品描述  
    描述 试剂盒组成:
    组分名称 规格
    小鼠正常卵巢类器官培养基 A 100ml
    原代培养缓冲液 B 250ml
    小鼠正常卵巢原代组织消化液 C 30ml
    类器官传代消化液 D 30ml
    组织保存液 E 100ml
    类器官冻存液 F 20ml
    类器官传代培养缓冲液 G 250ml
    使用方法 1、原代
    (1)取材后的小鼠正常卵巢组织须在 2 - 8℃清洗,准备若干培养皿,加入 4℃预冷的原代培养缓冲液B 备用(添加双抗和庆大霉素)。
    (2)将组织放入培养皿中,利用原代培养缓冲液B清洗三次后,利用眼科剪或手术刀将组织剪切成体积约为 1-3 mm3 的组织块。
    (3)组织用小鼠正常卵巢原代组织消化液C消化,37℃震荡消化15-20 min,(消化过程中随时观察消化情况)。
    (4)取少量液体在显微镜下观察,镜下观察到较多的单个细胞或 70um 以下的细胞簇后,加入三倍体积原代培养缓冲液B终止消化。
    (5)使用100um孔径的筛网进行过滤,将滤液收集后,于300g富集离心5min后移去上清,添加原代培养缓冲液B重新重悬离心。
    (6)基质胶计算:第6步后观察收集到的组织体积,添加25-30倍组织体积的基质胶(abs9495)重悬铺板。
    (7)24孔细胞培养板为例,每孔点胶25ul组织基质胶混合物进行铺板(4℃下操作)。
    (8)将铺好的培养板放入37℃培养箱中10-15min成胶,添加小鼠正常卵巢类器官培养基A(恢复室温)进行培养。

    2、类器官传代培养
    (1)移液器吸去培养基,每孔添加1-2ml 4℃类器官传代培养缓冲液 G 放置2min。
    (2)移液抢轻柔吹打基质胶,收集在15ml离心管中,4℃静置10min。(每6-8孔为一组)
    (3)a:类器官数量不足或体积较小时: 离心5min弃去上清,添加适量类器官传代培养缓冲液 G 重悬移入1.5ml离心管,300g离心5min弃去液体进行第4步。
             b:类器官数量较多或体积较大时:离心5min弃去上清,添加适量类器官传代消化液 D 消化2-3min,添加类器官传代培养缓冲液 G 终止消化,离心5min弃去混合液,添加适量类器官传代培养缓冲液 G 重悬移入1.5ml离心管,300g离心5min弃去液体进行第4步。
    (4)类器官收集后,添加基质胶重悬,每孔25ul基质胶铺在24孔细胞培养板中,放置培养箱中10-15min添加500ul小鼠正常卵巢类器官培养基 A。

    3、类器官冻存
    (1)移液器吸去培养基,每孔添加1-2ml 4℃类器官传代培养缓冲液 G 放置2min。
    (2)移液抢轻柔吹打基质胶,收集在15ml离心管中,4℃静置10min。(每6-8孔为一组)
    (3)离心5min弃去上清,添加适量类器官传代培养缓冲液 G 再次重悬,300g离心5min弃去液体。
    (4)添加适量类器官冻存液 F,轻柔吹打重悬,以24孔细胞培养板为例:密度为2个孔冻存1管,每管体积1.4ml。
    (5)做好标记信息,进行程序降温后,移入液氮长期保存。

    4、类器官复苏
    (1)取10ml类器官传代培养缓冲液 G 于15ml离心管中。
    (2)从液氮罐中取出冻存的类器官细胞,快速置于 37℃水浴锅中融解。
    (3)水浴融解过程中,需轻轻摇动冷冻管,以确保冻存液在 1-2min内完全融解。
    (4)将溶解后的类器官细胞快速转移至15ml 离心管,使用移液管轻轻吹打6-8次,300g 离心 5min,然后除去上清液并收集类器官细胞沉淀。添加适量类器官传代培养缓冲液 G 重悬移入1.5ml离心管300g离心5min。
    (5)基质胶重悬,每孔25ul基质胶铺在24孔细胞培养板中,放置培养箱中10-15min成胶,添加500ul小鼠正常卵巢类器官培养基 A。
    储存/保存方法 4°C保存,有效期3个月;-20°C保存,有效期1年,详见标签。

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