- ￥6500
- 爱必信(absin)
- abs9754
- 上海
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
-
- 细胞类型：
-
- 肿瘤类型：
-
- 供应商：
爱必信(上海)生物科技有限公司
- 库存：
现货
- 生长状态：
-
- 年限：
4°C保存，有效期3个月；-20°C保存，有效期1年，详见标签
- 运输方式：
4°C保存，有效期3个月；-20°C保存，有效期1年，详见标签
- 器官来源：
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- 是否是肿瘤细胞：
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- 细胞形态：
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- 免疫类型：
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- 物种来源：
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- 相关疾病：
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- 组织来源：
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- 英文名：
Mouse ovary Organoid Culture Kit
- 规格：
1kit
| 产品描述 | |||||||||||||||||
| 描述 | 试剂盒组成：
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| 使用方法 | 1、原代 （1）取材后的小鼠正常卵巢组织须在 2 - 8℃清洗，准备若干培养皿，加入 4℃预冷的原代培养缓冲液B 备用（添加双抗和庆大霉素）。 （2）将组织放入培养皿中，利用原代培养缓冲液B清洗三次后，利用眼科剪或手术刀将组织剪切成体积约为 1-3 mm3 的组织块。 （3）组织用小鼠正常卵巢原代组织消化液C消化，37℃震荡消化15-20 min，（消化过程中随时观察消化情况）。 （4）取少量液体在显微镜下观察，镜下观察到较多的单个细胞或 70um 以下的细胞簇后，加入三倍体积原代培养缓冲液B终止消化。 （5）使用100um孔径的筛网进行过滤，将滤液收集后，于300g富集离心5min后移去上清，添加原代培养缓冲液B重新重悬离心。 （6）基质胶计算：第6步后观察收集到的组织体积，添加25-30倍组织体积的基质胶（abs9495）重悬铺板。 （7）24孔细胞培养板为例，每孔点胶25ul组织基质胶混合物进行铺板（4℃下操作）。 （8）将铺好的培养板放入37℃培养箱中10-15min成胶，添加小鼠正常卵巢类器官培养基A（恢复室温）进行培养。 2、类器官传代培养 （1）移液器吸去培养基，每孔添加1-2ml 4℃类器官传代培养缓冲液 G 放置2min。 （2）移液抢轻柔吹打基质胶，收集在15ml离心管中，4℃静置10min。（每6-8孔为一组） （3）a：类器官数量不足或体积较小时： 离心5min弃去上清，添加适量类器官传代培养缓冲液 G 重悬移入1.5ml离心管，300g离心5min弃去液体进行第4步。 b：类器官数量较多或体积较大时：离心5min弃去上清，添加适量类器官传代消化液 D 消化2-3min，添加类器官传代培养缓冲液 G 终止消化，离心5min弃去混合液，添加适量类器官传代培养缓冲液 G 重悬移入1.5ml离心管，300g离心5min弃去液体进行第4步。 （4）类器官收集后，添加基质胶重悬，每孔25ul基质胶铺在24孔细胞培养板中，放置培养箱中10-15min添加500ul小鼠正常卵巢类器官培养基 A。 3、类器官冻存 （1）移液器吸去培养基，每孔添加1-2ml 4℃类器官传代培养缓冲液 G 放置2min。 （2）移液抢轻柔吹打基质胶，收集在15ml离心管中，4℃静置10min。（每6-8孔为一组） （3）离心5min弃去上清，添加适量类器官传代培养缓冲液 G 再次重悬，300g离心5min弃去液体。 （4）添加适量类器官冻存液 F，轻柔吹打重悬，以24孔细胞培养板为例：密度为2个孔冻存1管，每管体积1.4ml。 （5）做好标记信息，进行程序降温后，移入液氮长期保存。 4、类器官复苏 （1）取10ml类器官传代培养缓冲液 G 于15ml离心管中。 （2）从液氮罐中取出冻存的类器官细胞，快速置于 37℃水浴锅中融解。 （3）水浴融解过程中，需轻轻摇动冷冻管，以确保冻存液在 1-2min内完全融解。 （4）将溶解后的类器官细胞快速转移至15ml 离心管，使用移液管轻轻吹打6-8次，300g 离心 5min，然后除去上清液并收集类器官细胞沉淀。添加适量类器官传代培养缓冲液 G 重悬移入1.5ml离心管300g离心5min。 （5）基质胶重悬，每孔25ul基质胶铺在24孔细胞培养板中，放置培养箱中10-15min成胶，添加500ul小鼠正常卵巢类器官培养基 A。 |
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| 储存/保存方法 | 4°C保存，有效期3个月；-20°C保存，有效期1年，详见标签。 |
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文献和实验肿瘤情况，又兼具了细胞系的可传代、易于高通量筛选等特性。因此，CRC 类器官模型正在广泛应用于药物研究、个性化医疗等领域。 本篇文章基于 Nature Chemical Biology【4】、STAR protocols【5】、Nature protocols【6】和 Cell【7】发表的四篇文章，整理了人类结直肠癌组织来源的类器官培养方案。 图 1. 病人组织来源的 CRC 类器官研究方案【8】 细胞来源 活检样本或手术样本 培养基配方 解离培养基 类器官培养基 红细胞
胎肾组织中的 SPs，目前这个方案只在小鼠 ESCs 验证过有效性和可行性。 图 1. 具有肾脏高阶结构的肾脏类器官培养方案示意图【3】 细胞来源 hiPSCs 培养试剂配方 UB谱系诱导 NP谱系诱导 近岸蛋白产品货号 hiPSCs培养基 hiPSCs分化培养基 Step 1培养基 Step 2培养基 Step 3培养基 Step 4培养基 Step 5培养基 Step 6培养基 Step 7培养基 分枝形成培养
性选择不同强度的解离方式。 （1）根据肿瘤组织的坚硬度和目的细胞不同，可以选择合适的解离方案。 （2）剔除坏死/出血区域（剪刀精细修剪），保留活性肿瘤组织。 （3）由于肿瘤组织比较坚硬，会产生较多碎片和死细胞，影响下游实验可以通过Ficoll或者去死或碎片去除试剂盒（Debris Removal Solution，130-109-398）优化肿瘤样本。 6. 如何得到肝实质细胞？ 小鼠和大鼠的肝脏组织包含实质细胞和非实质细胞（Kupffer细胞、肝星状细胞、肝窦内皮细胞、胆管上皮细胞、免疫
