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- 2025年07月11日
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96T
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文献和实验3). In the initiation step, input dsRNA is digested into 21-23 nucleotide small interfering RNAs (siRNAs), which have also been called "guide RNAs" (reviewed in 3, 18, 27). Evidence indicates that siRNAs are produced when the enzyme Dicer, a member of the RNase III
pri-miRNA 的核内加工[7]。生成的pre-miRNA由核膜上的Exportin-5转运蛋白，转运到胞浆中，进一步被Dicer 酶加工[9]。Exportin-5同时还介导tRNA、腺病毒VA1 等非编码RNA的核输出[ 10 ]。 1.2 Dicer 及其辅助蛋白质 siRNA/miRNA 的成熟是RNase III家族第III亚家族酶――Dicer加工完成[11]。哺乳动物Dicer 是一个相对分子质量约200 000 的多结构域蛋白质[12,13]，通常含有6 个结构
和筛选有效siRNA序列的步骤，为研究人员节省时间和金钱（注意：通常用RNAse III通常比用Dicer要便宜）。不过这种方法的缺点也很明显，就是有可能引发非特异的基因沉默，特别是同源或者是密切相关的基因。现在多数的研究显示这种情况通常不会造成影响(1-4)。Ambion公司曾经用它的Silencer siRNA Cocktail Kit(RNase III)试剂盒成功关闭几个基因，包括c-fos, GAPDH, La, ?-actin, 和Ku-70。 最适
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