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- 提供商：
逸微健华
- 服务名称：
磷酸化蛋白组学
磷酸化蛋白组学
服务项目简介
蛋白质磷酸化(Phosphorylation)是由蛋白质激酶催化的把ATP的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基(Ser、Thr、Tyr)上的过程，或者在信号作用下结合GTP，是生物体内一种普通的调节方式，细胞内有超过30%的蛋白质发生磷酸化修饰，在细胞信号转导、调控细胞增殖、发育、分化、凋亡过程中起重要作用。蛋白质磷酸化是调节和控制蛋白质活力和功能的最基本、最普遍，也是最重要的机制。
技术原理
图1.磷酸化蛋白组学技术流程
服务优势
客户提供
血清、血浆、脑脊液、尿液、胸水、腹水、唾液等体液、细胞上清、植物样本和其他特殊样本。
送样要求
不同生物流体样本类型根据后续研究目的和方法按照要求进行样本前处理。
注：
交付结果
15个工作日
文献资料
[1] Chen IH, Xue L, Hsu CC, Paez JS, Pan L, Andaluz H, Wendt MK, Iliuk AB, Zhu JK, Tao WA. Phosphoproteins in extracellular vesicles as candidate markers for breast cancer. Proc Natl Acad Sci U S A. 2017 Mar 21;114(12):3175-3180.
[2] Andaluz Aguilar H, Iliuk AB, Chen IH, Tao WA. Sequential phosphoproteomics and N-glycoproteomics of plasma-derived extracellular vesicles. Nat Protoc. 2020 Jan;15(1):161-180.
服务项目简介
蛋白质磷酸化(Phosphorylation)是由蛋白质激酶催化的把ATP的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基(Ser、Thr、Tyr)上的过程，或者在信号作用下结合GTP，是生物体内一种普通的调节方式，细胞内有超过30%的蛋白质发生磷酸化修饰，在细胞信号转导、调控细胞增殖、发育、分化、凋亡过程中起重要作用。蛋白质磷酸化是调节和控制蛋白质活力和功能的最基本、最普遍，也是最重要的机制。
技术原理
图1.磷酸化蛋白组学技术流程
服务优势
- 基于独家研发的PolyMAC磷酸化富集材料提升对磷酸化肽段的富集程度。
- 提供从样品前处理到生信分析的一站式技术服务。
- 服务周期短，性价比更高。
客户提供
血清、血浆、脑脊液、尿液、胸水、腹水、唾液等体液、细胞上清、植物样本和其他特殊样本。
送样要求
不同生物流体样本类型根据后续研究目的和方法按照要求进行样本前处理。
注：
- 血浆样本：请用EDTA抗凝管采集血液，将采集到的血液在4 ℃下1500 g，离心20 min，去除血液中的细胞；取上清，4 ℃下3000 g，离心15 min，收集上清（血浆），-80 ℃保存，足量干冰寄送。
- 血清样本：血液收集在离心管中室温条件下静置1 h进行凝固分层；然后3000 rpm室温离心10 min;取上清转至干净的离心管中。再12000 rpm、4 ℃离心10 min，取上清分装到 1.5 mL 离心管中每管0.2 mL，-80 ℃冻存，足量干冰寄送。
- 尿液样本：采集前、中、后段晨尿，4 ℃条件下2000 g离心20 min，除去细胞，-80 ℃保存，足量干冰寄送。
- 细胞上清：先用200-300 g离心10 min，再用3000 g离心10 min，最后0.22 μm过膜或者10000 g离心30min。
交付结果
- 磷酸化蛋白组学生信分析报告；
- 完整的实验步骤、使用仪器、试剂来源、软件检索参数等。
15个工作日
文献资料
[1] Chen IH, Xue L, Hsu CC, Paez JS, Pan L, Andaluz H, Wendt MK, Iliuk AB, Zhu JK, Tao WA. Phosphoproteins in extracellular vesicles as candidate markers for breast cancer. Proc Natl Acad Sci U S A. 2017 Mar 21;114(12):3175-3180.
[2] Andaluz Aguilar H, Iliuk AB, Chen IH, Tao WA. Sequential phosphoproteomics and N-glycoproteomics of plasma-derived extracellular vesicles. Nat Protoc. 2020 Jan;15(1):161-180.
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文献和实验相关实验
prince1101 非磷酸化抗体是识别总得蛋白的，比如AKT。 P-AKT和AKT其实只差一些磷酸基，分子量稍大点，以前听别人讲P-AKT和AKT之间有shift，有时候WB是可以做出来的。 用的是梯度胶？分子量在68KD左右。应该怎么样来配胶呢？梯度胶的浓度？ 谢谢！ prince1101 希望高手能赐教！ ourlab 某些 AKT抗体，如cell
本节课重点介绍磷酸化修饰位点的蛋白激酶预测、GSEA 方法、 iKAP方法等知识点。
haohuaiyong 各位战友，最近我在做磷酸化STAT3的检测，用cell signaling公司的磷酸化检测抗体与总STAT3抗体做WB，实验组（bFGF+EGF）与阳性对照的磷酸化水平是有增加的，但总STAT3在实验组是减少的而在对照组是强表达的，我看别人的文献都是将总STAT3作为阳性内参一样，应该是不变化的啊，为什么我做了好多次都是不均一的啊？实在是搞不明白，请做过这方面的战友帮忙!谢谢！ dzhzh 你的灌注
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