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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
40
- 英文名:
Vibrio spp.
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 弧菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4194 |
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
包装规格及成分:
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
公司正在出售的产品:
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文献和实验【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
。 2. 鼠尾直接PCR试剂盒(常温裂解):一步法 PCR;处理鼠尾样本无需加热;用于高通量鉴定、筛选。 3. 通用植物直接PCR试剂盒:无需进行 DNA 纯化;高效特异性扩增样品;用于多种植物叶片的处理。 4.EDTA抗凝血直接PCR试剂盒:无需预处理血液;世界上血液耐受能力最强的 PCR 反应体系;安全可靠。 5.植物总RNA提取试剂盒:整套试剂盒RNase-Free;RNA得率高;质量高;安全快速。 有奖免费试用: RIPA裂解液(中) 火晶梯度PCR仪 康宁SORENSON
-A尾巴的RNA分子加上一串A尾巴,然后用带有一段通用序列(universal tag)的Oligo-dT及RT酶来合成cDNA。这样设计的一个好处就是一次RT反应合成了所有miRNA分子以及其他小RNA、mRNA对应的cDNA,接下来想用来检测什么都可以,细细算来省了不少特异引物和多次RT反应的钱呢!整个RT反应操作也是非常简单,加入预先混好的酶,37℃孵育60min,95℃孵育5min即完成cDNA合成。 最后一步就是取出一点cDNA为扩增模板,加入正反引物和real-time PCR 试剂盒
状态下,SYBR Green I发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合,其荧光增加1000倍。所以,一个反应发出的全部荧光信号与出线的双链DNA量呈比列,且会随扩增产物的增加而增加。 SYBR Green I荧光染料与DNA双链的结合双链DNA结合染料的优点:实验设计简单,仅需要2个引物,不需要设计探针,无需设计多个探针即可以快速检验多个基因,且能够进行熔点曲线分析,检验扩增反应的特异性,低的初始成本,通用性好,因此国内外在科研中使用比较普遍。荧光探针法(Taqman 技术):PCR
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