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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
40
- 英文名:
Koi Herpesvirus(KHV)Sph
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 锦鲤疱疹病毒基因探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3712 |
原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
包装规格及成分:
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
公司正在出售的产品:
| Anti-GRP94 (gp96)/FITC 荧光素标记葡萄糖调节蛋白94抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | ADAM15: 去整合素样金属蛋白酶15抗体 0.1ml |
| Plexin B2: 神经丛蛋白B2抗体 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC67 卷曲螺旋结构域蛋白67抗体 规格 0.2ml |
| Anti-CBX5/FITC 荧光素标记CBX5抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | MN(Human Mannose) ELISA Kit 人甘露糖 96T |
| 人肾皮质上皮细胞(HRCEpiC)( 5×105 ) mCF, 小鼠心脏成纤维细胞 Mouse | Anti-IRAK 2/FITC 荧光素标记白介素-1受体相关激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| IB3 Others Human 人 IB3 / B3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | phospho-P70 S6 Kinase beta 2 (Ser370): 0酸化核糖体S6K2蛋白激酶抗体 0.1ml |
| 小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素);AtT-20 | Anti-cRaf/Raf1(c-raf 1) /FITC 荧光素标记抗cRaf/Raf1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Rhesus antibody Rh Phospho-TIF1 beta(Ser824) 0酸化转录中介因子Tif1β抗体 规格 0.1ml | Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor) “蒙”蛋白又称“波克曼”蛋白Multi-class antibodies规格: 0.5mg |
| Rhesus antibody Rh IgG/Cy5 Cy5标记的羊抗小鼠IgG 规格 0.1ml | HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
| RhoA (RhoA protein) RhoA抗原 0.5mg | ACHN, 人肾细胞腺癌细胞 |
| CD11c: 整合素αX抗体 0.1ml | 人肾实质细胞完全培养基 100mL |
| GLT8D2: 糖基转移酶GLT8D2抗体 0.2ml | VP0 Others Human Eerovirus 71 人肠道病毒71型 VP0 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
| Anti-LRP6 低密度脂蛋白受体相关蛋白6抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | SGC7901/DDP 人胃癌顺铂耐药株 |
| F VIII -Ag(Mouse coagulation factor VIII related antigen) ELISA Kit 小鼠凝血因子Ⅷ相关抗原Multi-class antibodies规格: 48T | 锦鲤疱疹病毒基因探针法荧光定量PCR试剂盒FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| XDH: 氧化酶抗体 0.1ml | 小鼠成纤维细胞 英文名称: L929 |
| ZNF146: 锌指蛋白146抗体 0.2ml | 虹膜色素上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) |
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文献和实验可分为荧光探针和荧光染料。荧光探针又包括Beacon技术(分子信标技术,以美国人Tagyi为代表)、 TaqMan探针(以美国ABI公司为代表)和FRET技术(以罗氏公司为代表)等;荧光染料包括饱和荧光染料和非饱和荧光染料,非饱和荧光染料的典型代表就是现在最常用的SYBR GreenⅠ;饱和荧光染料有EvaGreen、LC Green等。 嵌合荧光染料法(SYBR GreenⅠ)SYBR Green I是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料,与双链DNA非特异性结合。在游离
微笑刺客521 我是想提取RNA,然后在反转录,最后做荧光定量PCR。我用的标本是Hep-2喉癌细胞株,试剂盒是Biomiga_EZgeneTM Biozol RNA kit,每次收集50ml培养瓶里面的细胞,但是总是提取不出来RNA,条带上面也没有,郁闷之极,求解~ athena王 难道降解了? biolinkphilic 尝试用其它提取方法,不妨用传统的提取法或许有意想不到的效果
。目前被普遍使用的多种常规PCR方法如各种凝胶电泳PCR法,终点荧光定量法或PCR-ELISA法叫做终点PCR法。实时荧光定量PCR法最大的优点是克服了终点PCR法进入平台期或叫饱和期后定量的较大误差,实现DNA/RNA的精确定量。普通PCR技术发明于1983年,而实时荧光定量PCR技术发明于上世纪九十年代并于1996年生产出了世界上第一台实时荧光定量PCR仪,实时荧光定量PCR技术得以实现的技术要素主要有荧光定量PCR试剂盒和实时荧光定量PCR仪,我国荧光定量PCR试剂盒研发实力强大,生产厂家较多
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