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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
36
- 英文名:
Human Herpesvirus-8(HHV-8)8
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| RT-8(RT-8)人疱疹病毒8型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3669 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Rhesus antibody Rh BCL7C B细胞白血病/淋巴瘤蛋白7抗体 规格 0.2ml | Gzms-A ELISA Kit 大鼠颗粒酶AMulti-class antibodies规格: 48T |
| 16- Alpha OHE-1(Human 16- AlphaHydroxyestrogen 1) ELISA Kit 人16α羟基雌酮1 96T | Acetyl-Histone H3(K23): 乙酰化组蛋白H3抗体 0.2ml |
| ATPIF1: ATPIF1蛋白抗体 0.2ml | Anti-phospho-GAB2 (Tyr452) 0酸化接头蛋白Gab 2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| EC109,人食管癌细胞 | Rhesus antibody Rh ANGPTL4/ARP4 血管生成素样蛋白4抗体 规格 0.2ml |
| 原代平滑肌细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml | P I CP(Mouse Carboxyterminal propeptide of type I procollagenELISA Kit 小鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽 96T |
| GNM(人口腔鳞癌颈淋巴结转移癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0320BC3H1(小鼠脑瘤细胞)5×106cells/瓶×2 小型猪肾细胞;MPK | 已烯雌酚单克隆抗体 小鼠单抗 0.1 |
| Anti-PDK1/PDPK1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠30酸肌醇依赖性蛋白激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh phospho-ADRB2(Ser346) 0酸化能受体β2抗体 规格 0.1ml |
| NGFRAP1: 神经生长因子受体相关蛋白1抗体 0.2ml | CL-0324BT-20(人癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
| Anti-HNF-1 Alpha/FITC 荧光素标记肝细胞核因子1α抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | HA Others H15N8 甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| sTNF Alpha-RI(humen) 大鼠可溶性坏死因子-受体1Multi-class antibodies规格: 48T | SDC4 Others Mouse 小鼠 Syndecan-4 / SDC4 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| Gastrin(human)peptide(1-17) 胃泌素/蛙皮素(多肽人源) 0.5mg | 人骨骼肌细胞HSkMC |
| phospho-CDK6 (Tyr13): 0酸化周期素依赖性激酶6抗体 0.1ml | M14细胞,人黑色素瘤细胞 枯草芽孢杆菌黑色变种 人肺癌细胞;A-427 [A427] |
| Rhesus antibody Rh DSCC1 DSCC1蛋白抗体 规格 0.2ml | RT-8(RT-8)人疱疹病毒8型探针法荧光定量PCR试剂盒卵巢癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml |
| 羊抗猪IgG血清 0.5ml 国产 | EBV-转化人淋巴细胞 英文名称: CAM191 |
| EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 胶质细胞谷氨酸运载蛋白3抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | KCT2 Others Human 人 KCT2 / C5orf15 人细胞裂解液 (阳性对照) |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验随机引物 适用于长的或具有发卡结构的 RNA。适用于 rRNA、mRNA、tRNA 等所有 RNA 的反转录反应。主要用于单一模板的 RT-PCR 反应。 Oligo dT 适用于具有 PolyA 尾巴的 RNA。(原核生物的 RNA、真核生物的 Oligo dT rRNA 和 tRNA 不具PolyA 尾 巴。)由于 Oligo dT 要结合到 PolyA 尾巴上,所以对 RNA 样品的质量要求较高,即使有少量降解也 会使全长 cDNA 合成量大大减少。 基因特异性引物 与模板序列互补
定量RT-PCR (Quantitative RT-PCR)
A = B(1+e) n A=amplified products, B=input templates, n=cycle number, and e=amplification efficiency. Factors affecting amplification efficiency in the RT-PCR process include the efficiency of reverse
性由两个人工合成的引物序列决定。反应分三步: A.变性:通过加热使 DNA 双螺旋的氢键断裂,形成单链 DNA; B.退火:将反应混合液冷却至某一温度,使引物与模板结合。 C.延伸:在 DNA 聚合酶和 dNTPs 及 Mg2+存在下,退火引物沿 5‘ —— 3’ 方向延伸。 以上三步为一个循环,如此反复。 3. 逆转录酶和 RT-PCR 逆转录酶(reverse transcriptase)是存在于 RNA 病毒体内的依赖 RNA 的 DNA 聚合酶,至少具有以下三种活性: (1)依赖 RNA
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