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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
44
- 英文名:
Theileria sergenti
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 瑟氏泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4117 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| 人内源性糖皮质激素(GC)免疫试剂盒 Human glucocoicoid,GC ELISA Kit | 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)免疫试剂盒 Human alpha-fetoprotein Lens culinaris aggliin 1,AFP-L1 ELISA Kit | CD79 浓缩液 0.1ml 进口分装 |
| 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)免疫试剂盒 Mouse β-galactosidase,βGAL ELISA Kit | Human hirudin (Hirudin) ELISA Kit 人水蛭素(Hirudin)ELISA试剂盒 | CD20(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD20分子 96T |
| Bovine metallothionein (MT) ELISA Kit 牛金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 | 人酸性铁蛋白(AIF)免疫试剂盒 Human acidic isoferitin,AIF ELISA kit | PDGFRB Kit Human 人 PDGFRb / CD140b ELISA配对抗体 ELISA |
| Rat vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒 | 猪脂联素受体2(ADIPOR2)免疫试剂盒 Pig adiponectin receptor 2,ADIPOR2 ELISA kit | NTN (Neurturin) 神经生长因子(抗原) 0.5mg |
| Mouse apolipoprotein H (Apo-H) ELISA Kit 小鼠载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒 | 兔子白介素4(IL-4)免疫试剂盒 Rabbit Ierleukin 4,IL-4 ELISA Kit | P Gamma(Human Peptide Gamma) ELISA Kit 人γ肽 96T |
| 小鼠游离甲状腺素(FT4)免疫试剂盒 Mouse Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit | Rabbit Anti-Guinea pig IgG/APC APC标记的兔抗豚鼠IgG 0.1ml | sCD30(Mouse soluble cluster of differentiation 30) Elisa Kit 小鼠可溶性CD30 96T |
| 人载脂蛋白B100(Apo-B100)免疫试剂盒 Human Apo-B100 ELISA Kit | Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的驴抗豚鼠IgG 0.1ml | Human Thymopentin,TP-5 ELISA Kit 人胸腺五肽 96T |
| Rat anaphylatoxin / compleme fragme 4a (C4a) ELISA Kit 大鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒 | 瑟氏泰勒虫探针法荧光定量PCR试剂盒TNF- Beta(Human Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT 人坏死因子β 96T | Oxytetracycline/BSA 土霉素偶联血清白蛋白 2mg |
| Rats of 25 hydroxyvitamin D3 (25 (OH) ELISA kit D3/25 HVD3) ELISA Kit 大鼠25羟维生素D3(25(OH)ELISA试剂盒D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 | HD(Human Histone Deacetylase) ELISA Kit 人组织蛋白去乙酰化酶 96T | FSH(Human follicle-stimulating hormone) ELISA Kit 人促卵泡素 96T |
| 小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)免疫试剂盒 Mouse Perinuclear ai-neuophil cytoplasmic aibody,pANCA ELISA Kit | VDAC peptide 电压依赖性阴离子通道抗原 0.5mg | EHF(Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgG antibody) ELISA Kit 人抗流行性出血热病毒抗体IgG 96T |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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