- ￥4490
- 联祖
- LZ-P3517
- 国产
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
40
- 英文名：
Enterotoxigenic E.coli(ETEC)
- 保质期：
保存期限为12个月
- 供应商：
上海联祖
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 产肠毒素性大肠杆菌（大肠埃希氏菌）O139血清型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3517 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。
| Apo-E (Apolipoprotein E) 载脂蛋白E(抗原) 0.5mg | phospho-NF1(Ser2817)： 0酸化1型神经纤维瘤抗体 0.1ml |
| CDKL5： 周期素依赖性激酶样5抗体 0.2ml | Anti-KLK14/FITC 荧光素标记激肽释放酶14抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
| Rhesus antibody Rh ECP 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗体 规格 0.1ml | PDGF-BB(Human Platelet-Derived Growth Factor-BB) ELISA kit 人血小板衍生生长因子BBMulti-class antibodies规格： 48T |
| 大鼠外周血白细胞完全培养基 100mL | IgG-Fc/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml |
| PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞) 5×106cells/瓶×2 | CPT1A： 肉毒碱棕榈酰基转移酶1A抗体 0.1ml |
| 人子宫内膜腺癌细胞;HEC-1-B 大鼠子宫颈上皮细胞完全培养基 100mL | Rhesus antibody Rh DDAH-II 双甲基精氨酸水解酶2抗体 规格 0.2ml |
| Factor VIIIa light chain： 凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相关抗原轻链抗体 0.1ml | IGF-1R 浓缩液 0.1ml 进口分装 |
| Anti-SSTR5 生长抑素受体5抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml | IL36G Protein Human 重组人 IL36G / IL1F9 蛋白 |
| Anti-CD33L/OBBP1/FITC 荧光素标记兔CD33L抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | Ovary细胞，人卵巢癌细胞 兔成骨C细胞,IF细胞 胎盘滋养层细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) |
| Stella： 发育多能性相关蛋白3抗体 0.2ml | ANGPT2 Others Human 人 Angiopoietin-2 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| Rhesus antibody Rh IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗小鼠IgM 规格 0.1ml | MN-c, 小鼠皮质神经元 Mouse |
| Rhesus antibody Rh KEAP1/KLHL19 胞质接头蛋白Keap1抗体 规格 0.1ml | IL6ST Others Mouse 小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| C3 ELISA Kit 鲑鱼补体蛋白3 96T | 产肠毒素性大肠杆菌（大肠埃希氏菌）O139血清型探针法荧光定量PCR试剂盒IFNA8 Protein Human 重组人 Ierferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (His 标签) |
| Phospho-DARPP32 (Thr34)： 0酸化多巴胺/cAMP调节神经0蛋白抗体 0.1ml | 人结直肠腺癌细胞 英文名称： Caco-2 |
| Anti-H1N1-A/HRP(Influenza A virus)California 辣根过氧化物酶标记兔抗季节性A型人流感病毒H1N1抗体IgG(美国加州型)Multi-class antibodies规格： 0.2ml | PATU8988(人胰腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 视网膜muller细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) |
【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。
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文献和实验肠埃希氏菌（E. coli）通常称为大肠杆菌，是Escherich在1885年发现的，在相当长的一段时间内，一直被当作正常肠道菌群的组成部分，认为是非致病菌。直到20世纪中叶，才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性医学教育|网搜集整理，尤其对婴儿和幼畜（禽），常引起严重腹泻和败血症，它是一种普通的原核生物，根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类：致病性大肠杆菌（EPEC）、肠产毒性大肠杆菌（ETEC）、肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）、肠出血性大肠杆菌（EHEC）、肠黏附
(1)肠产毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic E. coli,ETEC)：引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度水泻，也可呈严重的霍乱样症状。腹泻常为自限性，一般2～3天即愈。营养不良者可达数周，也可反复发作。致病因素是LT或ST，或两者同时致病。有些菌株具有定居因子，常见者为O6：K15：H16、O25：K7：H42。鉴定ETEC主要测定大肠杆菌肠毒素，血清型有一定参考意义。 (2)肠致病性大肠杆菌(Enteropathogenic E.coli,EPEC):是婴儿腹泻的主要
血清型 此外，肠粘附性大肠杆菌（Enteroadhesive E.coli,EAEC）也可引起腹泻，但对其发病机理与血清型尚不了解。EAEC不侵入肠上皮细胞，不产生LT或ST，也无VT毒素。唯一特征是具有与Hep-2细胞（人喉上皮细胞癌细胞系）粘附的能力，故也称Hep-2细胞粘附性大肠杆菌。 三、微生物学检查法 （一）细菌的分离鉴定 1．标本：肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等，腹泻者取粪便。 2．
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