节瘤拟杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒

公司产品仅供科研研究实验、不得用于临床！

产品名称	规格	货号
节瘤拟杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒	50T	LZ-P3465

【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】




【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。
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Anti-HBV/pre S1/S2 protein /FITC 荧光素标记抗乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Apolipoprotein A V： 载脂蛋白A5抗体 0.2ml
Phospho-p90RSK (Thr573)： 0酸化丝酸/苏酸激酶p90RSK蛋白抗体 0.1ml	Rhesus antibody Rh CCDC146 卷曲螺旋结构域蛋白146抗体 规格 0.2ml
Anti-SLAMF9/CD2F-10/FITC 荧光素标记CD2F-10抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	NFKB p65 (Human NF-κΒ p65) KLISA Kit 人细胞核因子/k基因结合核因子 96T
CD97 Others Human 人 CD97 人细胞裂解液 (阳性对照)	Anti-JNK1/3 /FITC 荧光素标记c-Jun氨基末端激酶1/3抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人细胞裂解液 (阳性对照)	Pan Cytokeratin/p-CK： 广谱细胞角蛋白PCK抗体 0.1ml
小鼠脑瘤细胞;BC3H1	Anti-Phospho-Connexin 43 (Ser368) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠等0酸化Connexin 43蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Syk (Tyr525/526) 0酸化非受体型酪氨酸蛋白激酶抗体 规格 0.1ml	Sema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/FITC FITC标记的羊抗人IgG 规格 0.3ml	EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人细胞裂解液 (阳性对照)
TFAR19(TF-1 cell apoptsis-related gene 19) 凋亡相关蛋白TFAR19抗原 0.5mg	CL-0052Caki-1(人肾透明细胞癌细胞)5×106cells/瓶×2
Cbx8： 染色质结合蛋白Cbx8抗体 0.2ml	人膀胱上皮细胞完全培养基 100mL
GK3： 甘油激酶3抗体 0.2ml	PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
Anti-Mesothelioma 间质细胞蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	IFNA13 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 蛋白 (His 标签)
PI(Mouse Proinsulin) ELISA Kit 小鼠胰岛素原Multi-class antibodies规格： 48T	节瘤拟杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒RBP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 RBP4 人细胞裂解液 (阳性对照)
PPM1D： 原癌基因WIP1抗体 0.2ml	Romas(人淋巴瘤细胞)   5×106cells/瓶×2
Syntaxin 13： 神经突触素13抗体 0.2ml	CL-0149MCF-7(人癌细胞)5×106cells/瓶×2

【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。   
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